| 利用BSMV-VIGS技术快速分析小麦TNBL1基因的抗黄矮病功能 |
| |
| 引用本文： | 赵丹,赵继荣,黄茜,李宁,刘艳,黄占景,张增艳.利用BSMV-VIGS技术快速分析小麦TNBL1基因的抗黄矮病功能[J].作物学报,2011,37(11):2106-2110. |
| |
| 作者姓名： | 赵丹 赵继荣 黄茜 李宁 刘艳 黄占景 张增艳 |
| |
| 作者单位： | 1 中国农业科学院作物科学研究所 / 农作物基因资源与基因改良国家重大科学工程 / 农业部作物遗传育种重点开放实验室, 北京 100081; 2河北师范大学生命科学院, 河北石家庄 050016 |
| |
| 基金项目： | 国家高技术发展计划(863计划)重点项目(2006AA10A104)资助 |
| |
| 摘 要： | 小麦黄矮病是由蚜虫介导的大麦黄矮病毒(Barley yellow dwarf virus, BYDV)侵染引起的小麦重要病害之一。利用cDNA-AFLP分析，筛选出在抗黄矮病小麦易位系YW642中特异表达的长度为292 bp的 cDNA片段，以此片段为启始序列，利用RACE和RT-PCR技术克隆出该基因的全长cDNA序列，推导该基因编码1个NBS-LRR蛋白，将其命名为TNBL1。本研究利用大麦条纹花叶病毒(BSMV)诱导的基因沉默(virus-inducing gene silencing, VIGS)技术，快速分析TNBL1是否参与小麦抗黄矮病反应。通过PCR添加酶切位点、定向酶切与连接，将TNBL1特异的292bp片段反向整合到BSMV-γ链的多克隆位点上，获得重组载体BSMV-γ: TNBL1as，体外转录BSMV-VIGS载体的3个组分(BSMV-TNBL1as、BSMV-α和BSMV-β)，等量混合、摩擦接种到抗黄矮病的小麦易位系YW642幼苗叶片上，使YW642中TNBL1基因沉默，然后接种BYDV病原进行黄矮病抗性鉴定。结果表明，TNBL1基因沉默后的YW642对BYDV敏感、显现感病症状，其体内BYDV含量较未发生基因沉默的YW642中的明显增加，证明TNBL1基因是正向调控小麦抗BYDV反应的1个重要基因。
|
| 关 键 词： | 小麦 中间偃麦草 黄矮病 病毒诱导的基因沉默 NBS-LRR |
| 收稿时间： | 2011-02-18 |
Functional Analysis of TNBL1 Gene in Wheat Defense Response to Barley ye- llow dwarf virus Using BSMV-VIGS Technique |
| |
| ZHAO Dan,ZHAO Ji-Rong,HUANG Xi,LI Ning,LIU Yan,HUANG Zhan-Jing, ZHANG Zeng-Yan, National Key Facility for Crop Gene Resources , Genetic Improvement.Functional Analysis of TNBL1 Gene in Wheat Defense Response to Barley ye- llow dwarf virus Using BSMV-VIGS Technique[J].Acta Agronomica Sinica,2011,37(11):2106-2110. |
| |
| Authors: | ZHAO Dan ZHAO Ji-Rong HUANG Xi LI Ning LIU Yan HUANG Zhan-Jing ZHANG Zeng-Yan National Key Facility for Crop Gene Resources Genetic Improvement |
| |
| Institution: | 1.National Key Facility for Crop Gene Resources and Genetic Improvement, Institute of Crop Sciences / Key Laboratory of Crop Genetic and Breeding, Ministry of Agriculture, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100081, China;2.College of Life Science, Hebei Normal University, Shijiazhuang 050016, China |
| |
| Abstract: | Barley yellow dwarf virus (BYDV), transmitted by at least 25 species of aphids, causes one of the most serious virus diseases of wheat worldwide. Through cDNA-AFLP analysis, we identified a cDNA fragment with 292bp expressing in the BYDV-resistant wheat-Thinopyrun intermedium translocation line YW642, but not in susceptible wheat Zhong8601. The full-length cDNA sequence of the gene, namely TNBL1, was cloned by RACE and RT-PCR methods, which encodes a putative NBS-LRR protein. This study focused on the funct... |
| |
| Keywords: | Wheat Barley yellow dwarf virus Thinopyrum intermedium Virus-induced gene silencing NBS-LRR |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ |
| 点击此处可从《作物学报》浏览原始摘要信息 |
| 点击此处可从《作物学报》下载免费的PDF全文 |
|
