猪胸膜肺炎放线杆菌apxⅠA基因的克隆及其原核表达 |
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引用本文: | 王冬梅,刘磊,逯忠新,赵萍,高鹏程,储岳峰.猪胸膜肺炎放线杆菌apxⅠA基因的克隆及其原核表达[J].中国兽医科技,2005,35(5):373-376. |
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作者姓名: | 王冬梅 刘磊 逯忠新 赵萍 高鹏程 储岳峰 |
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作者单位: | [1]中国农业科学院兰州兽医研究所,甘肃兰州730046 [2]甘肃农业大学动物医学院,甘肃兰州730070 [3]甘肃农业大学动物医学院,甘肃兰州730070//中国农业科学院兰州兽医研究所,甘肃兰州730046 |
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摘 要: | 参照GenBank上登录的猪胸膜肺炎放线杆菌血清5型菌株(AF363361)的apxⅠA基因序列设计了1对特异性引物,用PCR法扩增apxⅠA基因,获得了3069bp的片段,将其克隆到pMD18-T载体,经酶切、PCR鉴定和序列分析,表明克隆是成功的。再将长为1149bp的apxⅠA基因的部分片段(编码ApxⅠ的N-端的片段)插入到原核表达载体pET-28(a)中,构建了重组表达质粒pET—apxⅠA,转化大肠埃希氏菌JM109(DE3),在IPTG诱导下获得了高效表达,经SDS-PAGE检测,证实表达产物大小约为41ku。
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关 键 词: | 胸膜肺炎放线杆菌 apxⅠA基因 克隆 原核表达 |
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