传染性法氏囊病毒VP2蛋白的高效表达与免疫原性分析 |
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引用本文: | 杨棋,魏蔷,刘运超,冯华,蒋大伟,陈玉梅,张改平.传染性法氏囊病毒VP2蛋白的高效表达与免疫原性分析[J].河南农业科学,2018(5). |
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作者姓名: | 杨棋 魏蔷 刘运超 冯华 蒋大伟 陈玉梅 张改平 |
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作者单位: | 河南农业大学生命科学学院;河南省农业科学院动物免疫学重点实验室/河南省动物免疫学重点实验室/农业部动物免疫学重点实验室 |
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摘 要: | 为了实现传染性法氏囊病毒(IBDV)B87毒株VP2蛋白在大肠杆菌中的高效可溶性表达,将IBDV B87毒株VP2基因插入原核表达载体p ET-28a(+),构建重组质粒p ET28a-VP2,将其转化不同大肠杆菌基因工程菌株,通过IPTG诱导表达VP2外源蛋白。利用鸡传染性法氏囊病抗原快速检测试纸筛选,确定了BL21(DE3)为VP2可溶性蛋白的高效表达菌株。SDS-PAGE、Western blot分析表明,VP2实现了可溶性表达,且可溶性VP2蛋白具有良好的反应原性。将表达的重组蛋白利用琼脂扩散试验(AGP)分析,结果表明,VP2蛋白的AGP效价达到1∶64。将重组蛋白免疫接种SPF鸡,制备的抗血清AGP效价可达1∶16,说明表达的B87毒株VP2蛋白免疫原性良好。
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