RNA干扰DGAT1和DGAT2基因在猪肝细胞中的表达 |
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引用本文: | 吴光松,李平,顾丽菊,林鹏飞,任丽群,杨蓉,黄维江,张芸,毛同辉,魏小红,田松军,燕志宏.RNA干扰DGAT1和DGAT2基因在猪肝细胞中的表达[J].河南农业科学,2018(8). |
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作者姓名: | 吴光松 李平 顾丽菊 林鹏飞 任丽群 杨蓉 黄维江 张芸 毛同辉 魏小红 田松军 燕志宏 |
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作者单位: | 贵州大学动物科学学院;贵州大学高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室;贵州省种畜禽种质测定中心;贵州优农谷生态产业有限公司;贵州省农业区域经济发展中心;铜仁市畜牧技术推广站;紫云自治县畜牧服务中心 |
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摘 要: | 为了探索DGAT1和DGAT2基因对宗地花猪脂肪沉积效率的影响,以宗地花猪为试验动物,针对基因DGAT1和DGAT2 mRNA序列设计6对shRNA序列,构建RNA干扰表达载体,将DGAT1和DGAT2的shRNA干扰载体分别转染至肝细胞中,采用荧光定量PCR筛选出最佳shRNA干扰载体,并测定最佳干扰组细胞代谢液中甘油三酯和总胆固醇含量变化。结果显示,所构建的6个shRNA干扰载体均能抑制肝细胞中目的基因的表达,肝细胞中DGAT1和DGAT2基因的最高抑制效率分别为78.45%和87.52%。转染干扰效率最佳的载体p GPU6/GFP/Neo-DGAT1-1和p GPU6/GFP/Neo-DGAT2-1后,肝细胞培养液中甘油三酯和总胆固醇含量均降低,两者差异不显著(P0.05)。转染p GPU6/GFP/Neo-DGAT2-1的肝细胞培养液中甘油三酯含量显著低于空白组(P0.05),DGAT1干扰载体的干扰效率略低于DGAT2干扰载体(P0.05)。综上,抑制DGAT1和DGAT2基因的表达,可降低肝细胞培养液中甘油三酯和总胆固醇含量。
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