阿勒泰羊内参基因GAPDH和β-actin实时定量PCR重组质粒标准品的构建

为了研究阿勒泰羊的GAPDH和β-actin基因的实时定量方法,并为其相关功能基因的表达研究提供基础,试验采用荧光实时定量PCR法,克隆绵羊的GAPDH和β-actin部分基因序列,并以常规PCR产物为标准品,建立了标准曲线及熔解曲线。结果表明:标准曲线的相关系数分别为0.999 9和1.000 0,扩增效率分别为96%和109%;熔解曲线峰形锐利,无非特异性杂峰,表明PCR产物单一,无引物二聚体及非特异扩增产物。说明所建立的方法特异性强、相关系数高,可应用于阿勒泰羊的功能基因表达的定量分析研究。