| 蓝舌病病毒 NS4 基因原核表达载体的构建与表达 |
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| 引用本文： | 马 骥,朱文青,林俊泓,易华山,胡庭俊.蓝舌病病毒 NS4 基因原核表达载体的构建与表达[J].西北农业学报,2022(9):1168-1173. |
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| 作者姓名： | 马 骥 朱文青 林俊泓 易华山 胡庭俊 |
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| 作者单位： | （1.广西大学 动物科学技术学院，南宁 530005；2.西南大学 动物医学院，重庆荣昌 402460） |
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| 基金项目： | 重庆市基础研究与前沿探索专项（cstc2018jcyjAX0615）。 |
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| 摘 要： | 蓝舌病病毒（Bluetounge virus，BTV）非结构蛋白4（Non-structural protein 4，NS4）拮抗干扰素的产生，在BTV逃避宿主天然免疫的过程中发挥重要作用。利用PCR扩增得到 NS4 基因，与空载体pET-32a双酶切后连接，构建pET-32a- NS4原核表达载体；将pET-32a- NS4转化至E.coli BL21感受态细胞，以IPTG诱导表达；利用SDS-PAGE确定IPTG的最佳诱导浓度、时间与重组蛋白的表达形式；利用Western blot分析重组蛋白的表达情况。结果表明，成功构建pET-32a- NS4原核表达载体；IPTG最佳诱导浓度为 0.8 mmol/L，时间为6 h，蛋白主要以包涵体形式表达；Western blot在27 ku处可见目的条带，与预期相符。本研究成功构建pET-32a- NS4原核表达载体，实现NS4蛋白的大量、高效表达，为进一步探究NS4蛋白在BTV拮抗宿主天然免疫中的作用机制提供材料。
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| 关 键 词： | 蓝舌病病毒 NS4 基因 载体构建 原核表达 |
Construction and Expression of Prokaryotic Expression Vector of Bluetongue Virus NS4 Gene |
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| MA Ji,ZHU Wenqing,LIN Junhong,YI Huashan and HU Tingjun.Construction and Expression of Prokaryotic Expression Vector of Bluetongue Virus NS4 Gene[J].Acta Agriculturae Boreali-occidentalis Sinica,2022(9):1168-1173. |
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| Authors: | MA Ji ZHU Wenqing LIN Junhong YI Huashan and HU Tingjun |
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| Keywords: | Bluetounge virus NS4 gene Vector construction Prokaryotic expression |
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