| 非肌肉肌球蛋白Ⅱ型重链A羧基端蛋白的真核表达及在猪繁殖与呼吸综合征病毒感染Marc-145细胞中的作用 |
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| 引用本文： | 吕军华,刘宁宁,赵钦,马玉萍,张冲,王向鹏,胡守彬,赵菲菲,吴海珍,肖一红,周恩民. 非肌肉肌球蛋白Ⅱ型重链A羧基端蛋白的真核表达及在猪繁殖与呼吸综合征病毒感染Marc-145细胞中的作用[J]. 畜牧兽医学报, 2012, 0(9): 1455-1462 |
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| 作者姓名： | 吕军华 刘宁宁 赵钦 马玉萍 张冲 王向鹏 胡守彬 赵菲菲 吴海珍 肖一红 周恩民 |
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| 作者单位： | 山东农业大学动物医学院;西北农林科技大学兽医免疫学研究所,西北农林科技大学动物医学院 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(30871857;U0931003/L01;30901063);转基因生物新品种培育重大专项(2009ZX08009-147B) |
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| 摘 要： | 前期研究结果证明抗猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP5蛋白的抗独特型抗体特异性结合Marc-145细胞上的非肌肉肌球蛋白Ⅱ型重链A(Nonmuscle myosin heavy chainⅡ-A,NMHCⅡ-A)蛋白,其结合位点位于NMHCⅡ-A的羧基端。本研究通过真核表达NMHCⅡ-A的羧基端(PRA)蛋白,验证其对PRRSV感染Marc-145细胞的作用。通过Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达PRA蛋白。Western blot和间接免疫荧光鉴定PRA蛋白的表达及其与Marc-145细胞的结合。通过病毒中和试验、荧光聚焦中和试验和荧光定量PCR检测PRA蛋白对PRRSV感染Marc-145细胞的作用。Western blot和间接免疫荧光结果表明,PRA蛋白在真核细胞中得到成功表达,其最高表达量为接种1个MOI杆状病毒后96h时。PRA蛋白特异性结合Marc-145细胞,使PRRSV感染Marc-145细胞延迟24h并且感染效率降低60%。真核表达的NMHCⅡ-A羧基端蛋白能特异性结合Marc-145细胞并有效降低PRRSV的感染。这些结果为进一步阐明NMHCⅡ-A在PRRSV感染细胞过程中的作用提供了新的依据。
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| 关 键 词： | 猪繁殖与呼吸综合征病毒 非肌肉肌球蛋白Ⅱ型重链A 杆状病毒 抑制作用 |
Eukaryotic Expression of Nonmuscle Myosin Heavy Chain II-A C-terminus Protein and Its Roles in Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus Infection of Marc-145 Cells |
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| LV Jun-hua,LIU Ning-ning,ZHAO Qin,MA Yu-ping,ZHANG Chong,WANG Xiang-peng,HU Shou-bin,ZHAO Fei-fei,WU Hai-zhen,XIAO Yi-hong,ZHOU En-min. Eukaryotic Expression of Nonmuscle Myosin Heavy Chain II-A C-terminus Protein and Its Roles in Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus Infection of Marc-145 Cells[J]. Chinese Journal of Animal and Veterinary Sciences, 2012, 0(9): 1455-1462 |
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| Authors: | LV Jun-hua LIU Ning-ning ZHAO Qin MA Yu-ping ZHANG Chong WANG Xiang-peng HU Shou-bin ZHAO Fei-fei WU Hai-zhen XIAO Yi-hong ZHOU En-min |
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| Affiliation: | 1.College of Veterinary Medicine,Shandong Agricultural University,Taian 271018,China; 2.Immunology Institute of Northwest A & F University,College of Veterinary Medicine, Northwest A & F University,Yangling 712100,China) |
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