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发酵豆乳主要乳酸菌实时荧光定量PCR检测方法的建立
作者姓名:孙畅  安彬  杨柳  王国超  冯时荣  于寒松  王玉华  任大勇
作者单位:吉林农业大学食品科学与工程学院/国家大豆产业技术体系加工研究室
基金项目:现代农业产业技术体系建设专项(CARS-04);;吉林省教育厅“十三五”科学技术项目(JJKH20190926KJ);;国家重点研发项目(2017YFE0105400);
摘    要:为快速检测发酵豆乳中主要乳酸菌植物乳杆菌、副干酪乳杆菌含量,建立实时荧光定量聚合酶链式反应检测方法。根据植物乳杆菌、副干酪乳杆菌保守区域设计特异性引物和探针,验证建立的实时荧光定量PCR法的特异性、灵敏度和重复性,并与国标法进行比较。结果表明:引物特异性强,实时荧光定量PCR法特异性及重复性较好;植物乳杆菌和副干酪乳杆菌的检验灵敏度分别达到1.3×10-4和1.0×10-5 ng·μL-1。分别建立植物乳杆菌和副干酪乳杆菌标准菌株的实时荧光定量PCR检验法的标准曲线,得出R2分别为0.994 3和0.999 6,表明线性关系较好,可进行发酵豆乳中2种菌株含量的检测,测得供试发酵豆乳中植物乳杆菌与副干酪乳杆菌比例为4∶1。实时荧光定量PCR法测得发酵豆乳中乳酸菌总量为(5.5±0.26)×109 CFU·mL-1,国标法检测为(5.3±0.43)×109 CFU·mL-1,2种方法检测结果无差异(P>0.05...

关 键 词:发酵豆乳  植物乳杆菌  副干酪乳杆菌  实时荧光定量PCR
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