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二氟沙星单克隆抗体的研制研制及其免疫学特征的鉴定
引用本文:李彬彬,邓瑞广,侯玉泽,张改平,王自良,赵东,刘庆堂,柴书军. 二氟沙星单克隆抗体的研制研制及其免疫学特征的鉴定[J]. 中国农学通报, 2008, 24(10)
作者姓名:李彬彬  邓瑞广  侯玉泽  张改平  王自良  赵东  刘庆堂  柴书军
摘    要:采用改进的碳二亚胺法,将半抗原二氟沙星(DIF)与载体牛血清白蛋白(BSA)和卵清白蛋白(OVA)偶联,制备得到二氟沙星全抗原DIF-BSA和DIF-OVA.采用紫外(UV),凝胶电泳(SDS-PAGE)进行鉴定;用BSA-DIF免疫BALB/C小鼠,间接ELISA和阻断ELISA选择细胞融合备用鼠;应用杂交瘤技术制备二氟沙星单克隆抗体(DIF mAB),并对其效价、亲和力和特异性等进行鉴定.结果表明,BSA与DIF偶联成功,分子结合比为1:4.7,筛选出1H10、2F12、4D8共3株敏感特异的杂交瘤细胞,间接ELISA效价细胞培养上清分别为1:5.12×102、1:3.2x101、1:2.56×102,腹水效价分别为1:2.56×105、1:1.28x105、1:6.4×104.同种亚型分别为IgG1、IgG1、IgG2a,亲和常数(Ka)分别为2.94×1010L/mol、1.72×1010L/mol和1.35×1010L/mol.亲和力最高的1H10对DIF的IC50为2.2ng/ml,单抗与其他氟喹诺酮类药物和磺胺类药物无交叉反应.通过试验获得高效价、敏感、特异的mAb,适用于动物性食品中DIF的残留检测的免疫学试验.

关 键 词:二氟沙星  人工免疫原  单克隆抗体  免疫学特性

Trituration and Immunologic Traits of Monoclonal Antibody for Difloxacin
Li Binbin,Deng Ruiguang,Hou Yuze,Zhang Gaiping,Wang Ziliang,Zhao Dong,Liu Qingtang,Chai Shujun. Trituration and Immunologic Traits of Monoclonal Antibody for Difloxacin[J]. Chinese Agricultural Science Bulletin, 2008, 24(10)
Authors:Li Binbin  Deng Ruiguang  Hou Yuze  Zhang Gaiping  Wang Ziliang  Zhao Dong  Liu Qingtang  Chai Shujun
Abstract:
Keywords:
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