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| 表达鸡传染性支气管炎病毒S基因的重组新城疫病毒构建 | |
| 引用本文： | 焦利红,葛金英,王琪,马文芝,步志高.表达鸡传染性支气管炎病毒S基因的重组新城疫病毒构建[J].中国预防兽医学报,2010,32(5). |
| 作者姓名： | 焦利红 葛金英 王琪 马文芝 步志高 |
| 作者单位： | 1. 天津农学院动物科学系,河北,天津,300384;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江,哈尔滨,150001 2. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江,哈尔滨,150001 3. 天津农学院动物科学系,河北,天津,300384 |
| 摘 要： | 为构建以新城疫病毒(NDV)为活毒载体表达鸡传染性支气管炎病毒(IBV)S基因的重组病毒,本研究利用RT-PCR技术,以IBV的Massachusetts41株RNA为模板,通过RT-PCR扩增得到IBV S基因(3534bp),将其插入到NDV感染性克隆pBRN-FL中,构建了含有IBV S基因的重组NDV cDNA克隆pBRN-FL-IBVS。利用磷酸钙转染法,在辅助质粒pBS-NP、pBS-P和pBS-L的共同作用下,将pBRN-FL-IBVS转染表达T7聚合酶重组痘病毒感染的BSR细胞,救获重组NDV(rL-IBVS)。采用RT-PCR检测接种重组病毒的鸡胚尿囊液,结果表明rL-IBVS中含有相应外源基因。IFA试验表明,rL-IBVS可与鸡抗IBV的高免血清发生特异性反应,证明S蛋白在感染的BSR细胞中得到表达。其鸡胚平均致死时间、脑内致病指数和静脉内致病指数等指标显示rL-IBVS保持了亲本疫苗株高滴度的鸡胚生长特性和低致病力特性。本研究采用反向遗传操作技术构建了表达IBV S蛋白的重组NDV,为进一步研制IBV和NDV的重组基因工程活载体疫苗奠定了基础。 |
| 关 键 词： | 重组新城疫病毒 传染性支气管炎病毒 S基因 |
Construction of a recombinant Newcastle disease virus expressing S gene of infectious bronchitis virus |
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| JIAO Li-hong,GE Jin-ying,WANG Qi,MA Wen-zhi,BU Zhi-gao.Construction of a recombinant Newcastle disease virus expressing S gene of infectious bronchitis virus[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2010,32(5). | |
| Authors: | JIAO Li-hong GE Jin-ying WANG Qi MA Wen-zhi BU Zhi-gao |
| Abstract: | |
| Keywords: | |
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