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| 嗜水气单胞菌外膜蛋白（OMP）的原核表达及其对BALB/c小鼠的免疫保护研究 | |
| 引用本文： | 胡春霞,李梅,李卫芬,许梓荣,沈文英. 嗜水气单胞菌外膜蛋白（OMP）的原核表达及其对BALB/c小鼠的免疫保护研究[J]. 农业生物技术学报, 2010, 18(2): 218-224. DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2010.02.003 |
| 作者姓名： | 胡春霞 李梅 李卫芬 许梓荣 沈文英 |
| 作者单位： | 1. 浙江大学教育部动物分子营养学重点实验室,杭州,310029;绍兴文理学院元培学院生命科学系,绍兴,312000 2. 浙江大学教育部动物分子营养学重点实验室,杭州,310029 3. 绍兴文理学院生命科学学院,绍兴,312000 |
| 基金项目： | 浙江省重大科技专项项目 |
| 摘 要： | 为确定嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila,Ah)AS1.927株外膜蛋白(OMP)的原核表达产物是否具有抗原性及其对小鼠的免疫保护力.本研究根据GenBank上嗜水气单胞菌外膜蛋白ompA基因序列(GenBank登录号:AF146597)设计1对引物,克隆出ompA全长基因1020 bp(GenBank登录号:EU309491),经Sal Ⅰ和Xhol Ⅰ双酶切后连接pET-30a(+),转化大肠杆菌(Escherichia cDli)BL21,IPTG诱导表达,并进行SDS-PAGE及Westernblot分析鉴定.结果显示重组基因工程菌E.coli[pET-30a-ompA]表达的融合蛋白分子量约为40.7kD,可以被鼠抗嗜水气单胞菌外膜蛋白抗血清识别.将重组基因工程菌Ecoli[pET-30a-om-pA]口服免疫BALB/c小鼠(Mus mussulus);末次免疫1周后用放射免疫分析小鼠肠粘膜分泌型免疫球蛋白A(sIgA)水平,检测结果揭示,该重组基因工程菌能提高sIgA的分泌(P<0.05);同时在小鼠血清中测出特异性抗体IgG(P<0.05).末次免疫2周后用100 LD50的Ah AS1.927(3.3×105> cfu/mL)腹腔注射攻击小鼠,口服重组菌对小鼠的相对免疫保护力(relative percent survival,RPS)为75%,表明重组基因工程菌可诱导小鼠对AhAS1.927产生一定的免疫保护作用. |
| 关 键 词： | 嗜水气单胞菌 外膜蛋白 原核表达 小鼠 免疫保护 |
Prokaryotic Expression of Outer Membrane Protein(OMP) from Aeromonas hydrophila and the Immunoprotection in BALB/c Mice |
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| Hu Chunxia,Li Mei,Li Weifen,Xu Zirong,Shen Wenying. Prokaryotic Expression of Outer Membrane Protein(OMP) from Aeromonas hydrophila and the Immunoprotection in BALB/c Mice[J]. Journal of Agricultural Biotechnology, 2010, 18(2): 218-224. DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2010.02.003 | |
| Authors: | Hu Chunxia Li Mei Li Weifen Xu Zirong Shen Wenying |
| Affiliation: | Hu Chunxia 1,2 Li Mei 1 Li Weifen 1 Xu Zirong 1 Shen Wenying 3 1 Key Laboratory of Animal Molecular Nutrition,Ministry of education,College of Animal Sciences,Zhejiang University,Hangzhou,310029,2 Department of Life Science,Shaoxing University Yuanpen College,Shaoxing,312000,3 College of Life Sciences,Shaoxing University |
| Abstract: | |
| Keywords: | Aeromonas hydrophila Outer membrane protein Prokaryotic expression Mice Immune protection |
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