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嗜水气单胞菌外膜蛋白(OMP)的原核表达及其对BALB/c小鼠的免疫保护研究
引用本文:胡春霞,李梅,李卫芬,许梓荣,沈文英.嗜水气单胞菌外膜蛋白(OMP)的原核表达及其对BALB/c小鼠的免疫保护研究[J].农业生物技术学报,2010,18(2):218-224.
作者姓名:胡春霞  李梅  李卫芬  许梓荣  沈文英
作者单位:1. 浙江大学教育部动物分子营养学重点实验室,杭州,310029;绍兴文理学院元培学院生命科学系,绍兴,312000
2. 浙江大学教育部动物分子营养学重点实验室,杭州,310029
3. 绍兴文理学院生命科学学院,绍兴,312000
基金项目:浙江省重大科技专项项目 
摘    要:为确定嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila,Ah)AS1.927株外膜蛋白(OMP)的原核表达产物是否具有抗原性及其对小鼠的免疫保护力.本研究根据GenBank上嗜水气单胞菌外膜蛋白ompA基因序列(GenBank登录号:AF146597)设计1对引物,克隆出ompA全长基因1020 bp(GenBank登录号:EU309491),经Sal Ⅰ和Xhol Ⅰ双酶切后连接pET-30a(+),转化大肠杆菌(Escherichia cDli)BL21,IPTG诱导表达,并进行SDS-PAGE及Westernblot分析鉴定.结果显示重组基因工程菌E.colipET-30a-ompA]表达的融合蛋白分子量约为40.7kD,可以被鼠抗嗜水气单胞菌外膜蛋白抗血清识别.将重组基因工程菌EcolipET-30a-om-pA]口服免疫BALB/c小鼠(Mus mussulus);末次免疫1周后用放射免疫分析小鼠肠粘膜分泌型免疫球蛋白A(sIgA)水平,检测结果揭示,该重组基因工程菌能提高sIgA的分泌(P<0.05);同时在小鼠血清中测出特异性抗体IgG(P<0.05).末次免疫2周后用100 LD50的Ah AS1.927(3.3×105> cfu/mL)腹腔注射攻击小鼠,口服重组菌对小鼠的相对免疫保护力(relative percent survival,RPS)为75%,表明重组基因工程菌可诱导小鼠对AhAS1.927产生一定的免疫保护作用.

关 键 词:嗜水气单胞菌  外膜蛋白  原核表达  小鼠  免疫保护

Prokaryotic Expression of Outer Membrane Protein(OMP) from Aeromonas hydrophila and the Immunoprotection in BALB/c Mice
Hu Chunxia,Li Mei,Li Weifen,Xu Zirong,Shen Wenying.Prokaryotic Expression of Outer Membrane Protein(OMP) from Aeromonas hydrophila and the Immunoprotection in BALB/c Mice[J].Journal of Agricultural Biotechnology,2010,18(2):218-224.
Authors:Hu Chunxia  Li Mei  Li Weifen  Xu Zirong  Shen Wenying
Institution:Hu Chunxia 1,2 Li Mei 1 Li Weifen 1 Xu Zirong 1 Shen Wenying 3 1 Key Laboratory of Animal Molecular Nutrition,Ministry of education,College of Animal Sciences,Zhejiang University,Hangzhou,310029,2 Department of Life Science,Shaoxing University Yuanpen College,Shaoxing,312000,3 College of Life Sciences,Shaoxing University
Abstract:
Keywords:Aeromonas hydrophila  Outer membrane protein  Prokaryotic expression  Mice  Immune protection  
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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