虹鳟IPNV分离株VP2蛋白的表达及免疫原性检测 |
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引用本文: | 赵景壮,贺文斌,徐黎明,纪锋,曹永生,胡朝,卢彤岩.虹鳟IPNV分离株VP2蛋白的表达及免疫原性检测[J].大连海洋大学学报,2019,34(2). |
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作者姓名: | 赵景壮 贺文斌 徐黎明 纪锋 曹永生 胡朝 卢彤岩 |
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作者单位: | 中国水产科学研究院黑龙江水产研究所,黑龙江 哈尔滨,150070;四川省都江堰管理局,四川 都江堰,611830 |
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基金项目: | 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项;黑龙江省应用技术研究与开发计划;中国博士后科学基金 |
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摘 要: | 为充分了解中国鱼类传染性胰腺坏死病病毒的系统进化,对流行病学调查分离出的虹鳟Oncorhynchus mykiss传染性胰腺坏死病病毒(IPNV)分离株进行了系统进化分析,利用软件综合分析了IPNV病毒表面蛋白VP2的跨膜区、亲水性、抗原性和表面可能性,对其特定区段进行了原核表达,并利用表达蛋白制备鼠抗血清及免疫学鉴定。结果表明:本实验室得到的分离株与中国已报道的毒株具有不同的来源;SDS-PAGE分析显示,表达纯化的VP2蛋白为单一条带,相对分子质量约为45 000;ELISA分析显示,利用表达蛋白制备的鼠抗血清与IPNV分离株细胞培养物的效价为1∶20 000,与VP2蛋白的效价为1∶40 000;间接免疫荧光分析显示,细胞感染IPNV病毒24、48 h后,该鼠抗血清均能与IPNV毒株发生特异性反应,并呈现出特异性绿色荧光。研究表明,本研究中表达的VP2蛋白与IPNV病毒的VP2蛋白具有相近的免疫原性,这一结果为IPNV检测方法的建立及疫苗的构建提供了重要的试验依据。
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关 键 词: | 传染性胰腺坏死病病毒 蛋白表达 VP2蛋白 免疫原性 |
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