| 不吸水链霉菌辽宁变种基因转移系统的建立 |
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| 引用本文： | 魏颖颖,赵秀香,吴元华.不吸水链霉菌辽宁变种基因转移系统的建立[J].沈阳农业大学学报,2008,39(4). |
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| 作者姓名： | 魏颖颖 赵秀香 吴元华 |
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| 作者单位： | 沈阳农业大学,植物保护学院,沈阳,110161 |
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| 基金项目： | 教育部高等学校博士点基金项目 |
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| 摘 要： | 以嘧肽霉素生物合成阻断突变株UV2136为研究对象,建立了不吸水链霉菌辽宁变种的基因转移系统.UV2136对硫链丝菌素高度敏感,选择含有该抗生素标记的质粒pU702和pWHM3,探索其转化UV2136的可能性.结果表明:UV2136含有较强的限制修饰系统,采取热衰减法获得原生质体、原生质体热处理、冷处理、EDTA处理、质粒DNA变性等,均不能实现质粒pH702向UV2136的转化.来自非甲基化宿主E.coli ET12567的pWHM3也无法实现转化,而源于E.coli DH5α的甲基化pWHM3.可以低频转化菌株UV2136,转化效率分别为4转化子·μg-1 pWHM3,经自身修饰的pWHM3可实现高效转化,达到104转化子·μg-1pWHM3.
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| 关 键 词： | 吸水链霉菌 嘧肽霉素 转化系统 质粒pWHM3 甲基化 |
Establishment of Gene Transformation System for Streptomyces ahygroscopicus var. Liaoningensis |
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| Abstract: | |
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