正交设计优化芒果SRAP-PCR反应体系及引物筛选 |
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作者姓名: | 赵英 付海天 周俊岸 李日旺 莫永龙 张宇 黄国弟 |
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作者单位: | 广西亚热带作物研究所,广西南宁,530001 |
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基金项目: | 广西壮族自治区亚热带作物研究所专项资金(编号桂热研201305)。 |
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摘 要: | 以芒果基因组DNA为模板,采用正交试验对模板DNA含量、引物浓度、2×Taq PCR Master Mix含量进行3因素5水平正交试验优化。结果表明,相关序列扩增多态性PCR(sequence related amplified polymorphism,SRAPPCR)最佳反应体系为:30 ng模板DNA、0.3μmol/L引物、10μL 2×Taq PCR Master Mix,总体积为25μL。运用该体系对10份芒果种质材料进行验证,证明该体系稳定可靠,并从100对引物组合中筛选出扩增条带清晰、多态性丰富的36对引物组合。
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关 键 词: | 芒果 SRAP标记 正交试验设计 体系优化 引物筛选 |
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