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山溪鲵皮肤β-microseminoprotein样蛋白的分离纯化及其cDNA克隆
引用本文:韩曜平,苏月菊,饶定齐,张志伟,夏德全,吴婷婷.山溪鲵皮肤β-microseminoprotein样蛋白的分离纯化及其cDNA克隆[J].农村.农业.农民,2007(3):94-99.
作者姓名:韩曜平  苏月菊  饶定齐  张志伟  夏德全  吴婷婷
作者单位:南京农业大学无锡渔业学院,江苏,无锡,214081;中国科学院昆明动物研究所,云南,昆明,650223 金陵科技学院动物科学与技术学院,江苏,南京,210038 中国科学院昆明动物研究所,云南,昆明,650223 南京农业大学无锡渔业学院,江苏,无锡,214081 南京农业大学无锡渔业学院,江苏,无锡,214081 南京农业大学无锡渔业学院,江苏,无锡,214081
摘    要:从山溪鲵(Batrachuperus pachunii)皮肤匀浆液中经过Sephadex G-50凝胶过滤、AKTA(R)Resource Q阴离子柱和反向高压液相C4柱分离纯化得到相对分子质量为12 000的蛋白.利用其N端氨基酸序列设计引物,从山溪鲵皮肤的cDNA中克隆并筛选到该蛋白的cDNA序列.该cDNA序列的开放阅读框为339 bp,编码113个氨基酸残基组成的蛋白.在BLAST数据库搜寻比对分析表明,该蛋白的氨基酸序列与来自人类及其他哺乳动物β-microseminoprotein蛋白具有约40%的序列同源性.这也是首次在两栖类动物皮肤中确认β-microseminoprotein.初级结构分析表明,该蛋白属于亲水性蛋白;多重序列比较显示,其氨基酸序列中的10个半胱氨酸位点及15个其他氨基酸位点与高等脊椎动物β-microseminoprotein中同种氨基酸有相同的位点.由此推测该蛋白属于β-microseminoprotein家族.

关 键 词:山溪鲵  β-microseminoprotein  分离纯化  cDNA序列克隆  皮肤匀浆液
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