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猪γ干扰素基因真核重组表达质粒的构建及活性测定
引用本文:张立娜,刘培欣,曹殿军,闫丽辉,贾竞波,危艳武.猪γ干扰素基因真核重组表达质粒的构建及活性测定[J].北京林业大学学报,2006(Z2).
作者姓名:张立娜  刘培欣  曹殿军  闫丽辉  贾竞波  危艳武
作者单位:东北林业大学野生动物资源学院,中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室,中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室,中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室,东北林业大学野生动物资源学院,中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室
摘    要:以含有全长猪γ干扰素基因的质粒为模板,通过PCR方法扩增猪γ干扰素并引入酶切位点,酶切后与PCI真核表达载体连接在一起,测序后经比较,所扩增序列同Genebank报道的IFN-γ序列同源性为99·8%.将重组质粒转染PK细胞,检测所转染的pIFN-γ的抗病毒活性.试验结果表明,转染pIFN-γ试验组与正常细胞接毒对照组比较有显著差异,说明所构建的重组质粒转染后具有抗病毒作用.

关 键 词:猪γ干扰素  真核表达  活性测定

Construction of recombinant eukaryotic expression plasmid of porcine IFN-gamma and its antiviral activity
Abstract:The gene pIFN-γ was amplified by polymerase chain reaction, and then cloned into the EcoRⅠ and SalⅠ sites of eukaryotic expression vector pCI-neo.After indentification,the results showed that its homologous rate was 99.8% with the sequence of genebank. pCI-pIFN-γ was transfected into PK cells with Lipofectamine~ TM 2000. Anti-virus assays were performed 24 hrs posttransfection, the results showed that there displayed significant differences between transfected group and the control. The pIFN-γ protein expressed in PK cells existed antiviral activity.
Keywords:porcine IFN-gamma  eukaryotic expression  activity mensuration
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