| 猪瘟病毒低温诱变疫苗Thiverval株感染性克隆的构建及病毒拯救 |
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| 引用本文： | 范运峰,赵启祖,赵耘,邹兴启,徐璐,张仲秋,王琴,宁宜宝.猪瘟病毒低温诱变疫苗Thiverval株感染性克隆的构建及病毒拯救[J].畜牧兽医学报,2009,40(9). |
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| 作者姓名： | 范运峰 赵启祖 赵耘 邹兴启 徐璐 张仲秋 王琴 宁宜宝 |
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| 作者单位： | 1. 中国兽医药品监察所,北京,100081;中国动物疫病预防控制中心,北京,100026
2. 中国兽医药品监察所,北京,100081 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，国家863计划 |
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| 摘 要： | 采用高保真DNA聚合酶,分7个片段扩增猪瘟病毒(CSFV)Thiverval株全基因组序列,克隆至pMD18-T载体并测序.经适当的连接策略将各片段连接克隆至低拷贝载体质粒pAC/F101,同时对病毒基因组5'和3'末端进行修饰,构建出含有T7启动子、榔头状(HH)核酶基因、CSFV Thiverval全基因组、丁型肝炎病毒(HDV)核酶基因和T7终止子的重组质粒pAC/F101/T1-7.利用T7 RNA聚合酶将线性化重组质粒pAC/F101/T1-7体外转录成基因组RNA,再使用脂质体转染将体外转录RNA转染PK-15细胞.通过传代、RT-PCR、免疫过氧化物酶细胞单层试验鉴定,表明成功的从感染性克隆拯救出活病毒粒子.猪瘟病毒低温诱变疫苗"Thiverval"株感染性克隆的构建及病毒的成功拯救,为进一步研究CSFV疫苗株的致弱机制提供了重要工具.
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| 关 键 词： | 猪瘟病毒 疫苗Thiverval株 感染性克隆 病毒拯救 |
Recovery of the Infectious Classical Swine Fever Virus from the Cloned cDNA of Low Temperature Attenuated Thiverval Strain |
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| FAN Yun-feng,ZHAO Qi-zu,ZHAO Yun,ZOU Xing-qi,XU Lu,ZHANG Zhong-qiu,WANG Qin,NING Yi-bao.Recovery of the Infectious Classical Swine Fever Virus from the Cloned cDNA of Low Temperature Attenuated Thiverval Strain[J].Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica,2009,40(9). |
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| Authors: | FAN Yun-feng ZHAO Qi-zu ZHAO Yun ZOU Xing-qi XU Lu ZHANG Zhong-qiu WANG Qin NING Yi-bao |
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