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香猪睾丸间质细胞TAS1R3基因干扰后对自噬相关因子的影响
引用本文:王涵,蒙利洁,刘文娇,徐永健,龚婷.香猪睾丸间质细胞TAS1R3基因干扰后对自噬相关因子的影响[J].畜牧兽医学报,2023(4):1525-1534.
作者姓名:王涵  蒙利洁  刘文娇  徐永健  龚婷
作者单位:1. 贵州大学高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室贵州省动物遗传育种与繁殖重点实验室;2. 贵州大学动物科学学院
基金项目:国家自然科学基金(31702117);;贵州省科学技术项目(黔科合基础[2020]1Y135、黔科合基础[2018]1404);;贵州省科技计划项目(黔科合服企[2018]4007(002)号);
摘    要:旨在探究TAS1R3基因通过mTOR对从江香猪自噬相关基因表达的影响。本试验选择30日龄健康雄性从江香猪3头,采集睾丸组织并培养出睾丸间质细胞。将构建成功的干扰载体和空载体转染至细胞中,利用qRT-PCR检测其对TAS1R3基因表达影响,运用qRT-PCR和Western blot检测TAS1R3基因干扰后对味觉受体第一家族一号受体(TAS1R1)、细胞外信号调节激酶1(ERK1)、细胞外信号调节激酶2(ERK2)、雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、BECN1和微管相关蛋白1轻链3β(MAP1LC3B)表达的影响。结果表明,当TAS1R3基因被干扰后,相较于shRNA-NC对照组,TAS1R1、ERK1、ERK2、mTOR基因mRNA表达量均极显著降低(P<0.01),自噬因子BECN1和MAP1LC3B表达量极显著升高(P<0.01)。Western blot结果表明当TAS1R3基因被干扰后,与shRNA-NC对照组相比,蛋白T1R3、T1R1、p-mTOR、p-S6K1、p-ERK12均极显著降低(P<0.01),而自噬蛋白Beclin 1表达量极显著升高(P<...

关 键 词:从江香猪  T1R3  RNA干扰  睾丸间质细胞  自噬
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