鸡骨骼肌中天然反义lncRNA VGLL2-AS的鉴定及其与VGLL2的关系研究

旨在探究鸡骨骼肌中VGLL2基因天然反义链转录本VGLL2 AS lncRNA(VGLL2-AS)与VGLL2的关系。本研究首先采用PCR和测序技术验证VGLL2-AS是否存在；之后分别采集不同周龄固始蛋鸡(1日龄、6周龄、16周龄、22周龄、30周龄，每个周龄各6只)组织样，采用荧光定量PCR分析VGLL2基因和其反义链转录本VGLL2-AS的表达谱；采用双向转录试验和核酸酶保护试验检测VGLL2和VGLL2-AS是否可以双向转录且两者之间关系；体外分离培养原代成肌细胞(11胚龄固始鸡胚),然后用2μg·mL^-1的放线菌素D处理成肌细胞(对照组不做处理),收取处理不同时间点细胞(0～8 h,每组各个时间点各做3个重复),检测VGLL2-AS与VGLL2的半衰期；分离鸡成肌细胞的细胞核和细胞质，通过RT-qPCR方法确定两者的细胞定位；利用PCR扩增及测序对VGLL2的转录本进行验证；最后利用RT-qPCR检测它们在固始蛋鸡胸肌组织(1日龄、6周龄、16周龄、22周龄、30周龄每个周龄各6只)中的时空表达规律和相关性。结果表明，VGLL2-AS在鸡的转录组中真实存...