干扰Mtmr3基因对C2C12细胞增殖与分化的影响 |
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引用本文: | 王开明,喻宗岗,徐雪莉,艾妮妮,李昕瞳,何俊,陶灯,张硕,马海明,张跃博.干扰Mtmr3基因对C2C12细胞增殖与分化的影响[J].畜牧兽医学报,2023(4):1478-1489. |
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作者姓名: | 王开明 喻宗岗 徐雪莉 艾妮妮 李昕瞳 何俊 陶灯 张硕 马海明 张跃博 |
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作者单位: | 1. 湖南农业大学动物科学技术学院;2. 岭南现代农业科学与技术广东省实验室;3. 农业农村部畜禽资源(猪)评价利用重点实验室 |
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摘 要: | 旨在探究肌管相关蛋白3(myotubularin related protein 3,Mtmr3)对C2C12细胞增殖与分化的调控作用及机制。本试验以小鼠成肌细胞系(C2C12)为试验材料,分别使用qRT-PCR和免疫荧光染色检测Mtmr3基因在成肌细胞生长期与分化期的mRNA表达水平和分化第6天时的分布形态。合成Mtmr3的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),试验分为siRNA NC对照组和Mtmr3 siRNA处理组(n=3),利用EdU、CCK-8、qRT-PCR、Western blot技术检测Mtmr3 siRNA对成肌细胞增殖与分化的影响,并通过信号通路研究调控成肌细胞增殖与分化的机制。结果显示,Mtmr3在生长期的mRNA水平表达量总体呈下降趋势,而在分化期的表达量呈逐渐上升趋势,Mtmr3免疫荧光染色呈肌管状。干扰Mtmr3后,细胞内Mtmr3基因的mRNA和蛋白表达水平均极显著地降低(P<0.01);在增殖试验中,转染细胞Mtmr3 siRNA后,极显著地增加了EdU阳性细胞占总细胞的比率和细胞活力(P<0.01);干扰...
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关 键 词: | 成肌细胞 Mtmr3 增殖 分化 Mtor |
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