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苦荞麦WRKY15转录因子基因的分子克隆及其在叶斑病原与激素诱导下的表达分析
作者姓名:曾丽佩  彭喜旭  邬清韬  田建红  唐新科  王海华
作者单位:1. 湖南科技大学生命科学与健康学院;2. 经济作物遗传改良与综合利用湖南省重点实验室;3. 重金属污染生态土壤修复与安全利用湖南省高校重点实验室
基金项目:科技部国家重点研发计划(2017YFE0117600);;湖南省教育厅重点科研项目(19A176);;国家大学生创新创业训练计划项目(202110534015);
摘    要:苦荞麦(Fagopyrum tataricum)叶斑病由链格孢(Alternaria alternata)和黑孢霉(Nigrospora osmanthi)引起。WRKY转录因子在植物免疫调节过程中发挥重要作用。研究苦荞麦FtWRKY15在叶斑病原与激素诱导下的表达,为深入解析FtWRKY15在植物抗病反应中的功能与机理奠定基础。采用逆转录PCR克隆获得了FtWRKY15的完整编码序列,长537 bp,编码178个氨基酸。FtWRKY15具有1个WRKY保守结构域,锌指类型为CCHH,属于WRKY IIc亚组。同源序列比对与系统进化分析表明,FtWRKY15与FtWRKY76的氨基酸序列同一性最高(64.0%),其次是藜麦(Chenopodium quinoa) WRKY50 (52.3%)。原生质体瞬时表达分析表明FtWRKY15定位在细胞核中,与亚细胞定位预测结果一致。酵母单杂交实验表明FtWRKY15具有转录激活活性,其N端为酸性结构区(30~60位),富含丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸磷酸化位点,可能负责转录激活。实时荧光定量PCR分析表明FtWRKY15在叶、花中的表达丰度最高,其次...

关 键 词:苦荞麦(Fagopyrum tataricum)  叶斑病原  WRKY转录因子  生物信息学分析  基因表达  亚细胞定位  转录激活活性
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