非洲猪瘟病毒RNA聚合酶亚基D205R基因生物信息学分析及多克隆抗体制备 |
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作者姓名: | 王国超 赵亚茹 张忠辉 张玉龙 白鸽 耿抒贤 樊洁 杨吉飞 关贵全 殷宏 罗建勋 牛庆丽 |
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作者单位: | 1. 中国农业科学院兰州兽医研究所国家非洲猪瘟区域实验室(兰州)家畜疫病病原生物学国家重点实验室;2. 渭南市动物疫病预防控制中心;3. 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心 |
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摘 要: | 非洲猪瘟病毒(African swine fever virus, ASFV)pD205R蛋白参与病毒基因的转录,属于ASFV RNA聚合酶,且与真核生物RNA聚合酶II RPB5亚基相似,为深入了解pD205R结构,功能及病毒与宿主之间的作用机制。利用DNAStar、MEGA7.0对GenBank中公布的不同毒株的ASFVD205R基因序列进行分析,利用ExPASy、GOR4、AlphaFold软件对该蛋白的理化性质及结构预测进行分析,并对其原核表达和制备抗pD205R蛋白多克隆抗体。结果显示:在不同基因型间D205R基因高度保守;利用ExPASy在线软件预测pD205R蛋白理化性质其分子式为C1088H1712N278O295S8,属亲水性蛋白,稳定性差;二级结构及三级结构预测显示,α螺旋是其主要结构形式,占比为35.12%;同时以ASFV-CN/SC/2019毒株基因组为模板,构建原核表达质粒pET-28a-D205R并转入Rosetta (DE3)感受态细胞,经IPTG...
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关 键 词: | 非洲猪瘟病毒 pD205R蛋白 原核表达 多克隆抗体 |
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