LPS对牦牛瘤胃上皮细胞补体C3激活和ATP生成代谢的影响 |
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引用本文: | 张祺琪,王俊梅,岳子奇,郭逸芯,施丽媛,张晓红,邹华围,彭全辉,薛白,王立志,王之盛,胡瑞.LPS对牦牛瘤胃上皮细胞补体C3激活和ATP生成代谢的影响[J].畜牧兽医学报,2023(11):4664-4675. |
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作者姓名: | 张祺琪 王俊梅 岳子奇 郭逸芯 施丽媛 张晓红 邹华围 彭全辉 薛白 王立志 王之盛 胡瑞 |
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作者单位: | 四川农业大学动物营养研究所肉用牛低碳养殖创新团队四川省牛低碳养殖与安全生产高校重点实验室 |
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基金项目: | 国家自然科学基金(32002201);;财政部和农业农村部:国家现代农业(肉牛牦牛)产业技术体系(CARS-37); |
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摘 要: | 旨在通过脂多糖(LPS)诱导牦牛瘤胃上皮细胞建立炎症模型,考察瘤胃上皮细胞作为非免疫细胞是否存在细胞内补体C3激活,及其对细胞三磷酸腺苷(ATP)生成的影响,为瘤胃健康营养调控技术提供试验依据。用不同浓度的LPS处理牦牛瘤胃上皮细胞系,采用CCK-8法测定细胞活力;ELISA试剂盒测定细胞内补体C3激活产物C3a、C3b浓度以及培养基中白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)浓度;化学法检测细胞内ATP浓度,线粒体红色荧光探针和流式细胞仪检测线粒体数量及膜电位;qPCR检测细胞IL-1β、IL-6、TNF-α,补体C3及其激活关键酶组织蛋白酶B(CTSB)和组织蛋白酶L(CTSL),以及ATP合成酶亚基(ATP5A和ATP5C1)等基因相对表达量。结果发现:1)不同浓度LPS处理后,牦牛瘤胃上皮细胞活力极显著下调(P<0.01),TNF-α、IL-1β和IL-6等促炎因子的基因表达量和浓度极显著上调(P<0.01),在LPS浓度为10μg·mL-1时,牦牛瘤胃上皮细胞炎症模型构建成功;2)炎症下,牦牛瘤胃...
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关 键 词: | 牦牛 瘤胃上皮细胞 免疫炎症 补体C3 ATP |
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