| 北京油鸡角膜缘干细胞分离培养及分化潜能研究 |
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| 引用本文： | 高也凡,宋哈楠,王育南,吴月,牛锐利,宗宪春,关伟军.北京油鸡角膜缘干细胞分离培养及分化潜能研究[J].中国畜牧兽医,2022,49(9):3372-3381. |
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| 作者姓名： | 高也凡 宋哈楠 王育南 吴月 牛锐利 宗宪春 关伟军 |
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| 作者单位： | 1. 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所, 北京 100193;2. 佳木斯大学, 佳木斯 154007;3. 牡丹江师范学院生命科学与技术学院, 牡丹江 157011 |
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| 基金项目： | 国家重点研发计划经费资助（2021YFD1200301） |
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| 摘 要： | 【目的】 研究北京油鸡角膜缘干细胞（LSCs）分离、培养、鉴定及多向分化潜能等生物学特性。【方法】 取10胚龄健康北京油鸡鸡胚的角膜缘，采用分散酶Ⅱ（dispaseⅡ）联合胰蛋白酶二步法分离细胞，进行体外培养，绘制生长曲线，通过免疫荧光和RT-PCR技术鉴定LSCs特异性标志物细胞角蛋白3（CK3）、CK12、细胞周期调控蛋白p63、ATP结合盒转运蛋白（ABCG2）和细胞角蛋白19（CK19）的表达；通过成骨和成软骨诱导检测其多向分化潜能。【结果】 获得的北京油鸡细胞折光性强、贴壁后呈多角形，生长曲线呈典型的S型，群体倍增时间（PDT）随着代次的升高逐渐下降；免疫荧光检测结果表明，分离的细胞中ABCG2、p63和CK19均呈阳性表达，CK3和CK12不表达；RT-PCR检测结果表明，分离的细胞表达p63、CK19、ABCG2，不表达CD45，说明分离的细胞为LSCs。LCSs成骨诱导分化后，可见被茜素红染色的矿化钙结节，RT-PCR检测结果表明其表达成骨关键基因骨桥蛋白（OPN）和Ⅰ型胶原蛋白（Col-Ⅰ）；成软骨诱导分化后，可见被阿利新蓝染色的软骨组织，RT-PCR检测结果表明其表达成软骨细胞关键基因转录因子性别决定区Y框9（SOX-9）和Ⅱ型胶原蛋白（Col-Ⅱ）。【结论】 本研究成功从10胚龄北京油鸡胚胎角膜缘中分离LSCs，且其具有良好的增殖活力及成骨和成软骨能力，结果可为禽类LSCs的资源保存研究提供参考。
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| 关 键 词： | 北京油鸡 角膜缘干细胞 生物学特性 诱导分化 |
| 收稿时间： | 2022-03-22 |
Study on the Isolation,Culture and Differentiation Potential of Limbal Stem Cells from Beijing You Chickens |
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| GAO Yefan,SONG Hanan,WANG Yunan,WU Yue,NIU Ruili,ZONG Xianchun,GUAN Weijun.Study on the Isolation,Culture and Differentiation Potential of Limbal Stem Cells from Beijing You Chickens[J].China Animal Husbandry & Veterinary Medicine,2022,49(9):3372-3381. |
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| Authors: | GAO Yefan SONG Hanan WANG Yunan WU Yue NIU Ruili ZONG Xianchun GUAN Weijun |
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| Institution: | 1. Institute of Animal Sciences, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100193, China;2. Jiamusi University, Jiamusi 154007, China;3. College of Life Science and Technology, Mudanjiang Normal University, Mudanjiang 157011, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Beijing You chickens limbal stem cells biological characteristics induced differentiation |
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