基于F和HN蛋白的基因Ⅶ型新城疫病毒嵌合疫苗的构建及免疫效力评估 |
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作者姓名: | 李丽 王国康 商雨 徐英英 冯贺龙 汪宏才 张蓉蓉 曾哲 罗青平 邵华斌 曾驰 温国元 |
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作者单位: | 1. 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所, 武汉 430064;2. 农业农村部畜禽细菌病防治制剂创制重点实验室, 武汉 430064;3. 畜禽病原微生物学湖北重点实验室, 武汉 430064;4. 武汉轻工大学生物与制药工程学院, 武汉 430023 |
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基金项目: | 湖北省自然科学基金杰出青年人才项目(2019CFA071);国家自然科学基金面上项目(31873018);国家现代农业产业技术体系(CARS-41-G13);湖北省农业科技创新中心项目(2019-620-000-001-017);湖北省科技创新项目重大专项(2020ABA016) |
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摘 要: | 【目的】试验旨在构建一种基因Ⅶ型新城疫病毒(Newcastle disease virus, NDV)嵌合疫苗,并对其免疫效力进行评估。【方法】利用反向遗传学技术,以含有禽偏禽腮腺炎病毒2型(Avian metaavulavirus-2,AMAV-2)Y2株基因组的重组质粒pT7-Y2为模板,将Y2株的F和HN蛋白的胞外区替换为基因Ⅶ型NDV HB0901株的F和HN蛋白的胞外区,将HB0901株的F蛋白裂解位点突变为LaSota弱毒株的F蛋白裂解位点,构建嵌合重组病毒rY2-FHNR株。对rY2-FHNR株的增殖特性、致病力及遗传稳定性等生物学特性进行检测,并通过接种2周龄SPF鸡评估rY2-FHNR株的免疫原性及其免疫血清与Y2株的交叉反应性,利用NDV NP蛋白的间接ELISA方法对免疫血清进行检测,验证其鉴别诊断效果。【结果】试验成功获得了嵌合重组病毒rY2-FHNR株,生物学特性检测结果显示,rY2-FHNR株在鸡胚中的增殖滴度和致病性符合弱毒特征,其鸡胚传代的遗传稳定性良好。rY2-FHNR株可诱导机体产生针对NDV的抗体,且免疫血清不与rY2株抗原发生交叉反应。通过NDV...
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关 键 词: | 新城疫病毒(NDV) 基因Ⅶ型 禽偏禽腮腺炎病毒血清2型(AMAV-2) 反向遗传技术 嵌合疫苗 |
收稿时间: | 2022-04-01 |
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