| 摘 要： | 【目的】探讨TGF-β1对奶牛乳腺上皮细胞增殖、凋亡和HSP70蛋白表达的影响。【方法】TGF-β1作用乳腺上皮细胞不同时间，收集细胞及培养液，应用MTT检测细胞增殖、流式细胞术检测细胞凋亡率、比色法检测LDH活性、琼脂糖凝胶电泳检测DNA完整性、Western bolt 技术分析HSP70蛋白的表达量。【结果】1、5、10 ng•ml-1的TGF-β1均能抑制乳腺上皮细胞的增殖，且随浓度增加抑制作用加大，呈现剂量依赖性，其中10 ng•ml-1 TGF-β1组与对照组差异显著（P＜0.05）；10 ng•ml-1 TGF-β1作用于乳腺上皮细胞, 随着作用时间的延长，细胞凋亡率逐渐升高，其中6、12和24 h与对照组相比差异极显著（P＜0.01）；LDH活力随作用时间延长而升高，12、24 h与对照组差异极显著（P＜0.01）；DNA完整性随 TGF-β1作用时间的延长发生不同程度降解；TGF-β1作用2～6 h细胞大量表达HSP70，6 h达到高峰，而后下降，2～12 h的表达量均极显著高于对照组（P＜0.01）。【结论】TGF-β1可以抑制奶牛乳腺上皮细胞的增殖，具有浓度依赖性。10 ng•ml-1 TGF-β1可以显著增加细胞凋亡率，提高细胞培养液中LDH活力，使细胞DNA发生不同程度的降解，同时HSP70蛋白随TGF-β1作用时间发生显著的表达变化。本试验结果表明，TGF-β1可以以促进上皮细胞凋亡的方式，促进奶牛乳腺发生退化。
|
