尼罗罗非鱼跨膜Bax抑制剂母体6基因Tmbim 6的克隆、表达及功能鉴定 |
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引用本文: | 巫祎琴,陈福暖,张志强,江栢坚,简纪常,黄瑜.尼罗罗非鱼跨膜Bax抑制剂母体6基因Tmbim 6的克隆、表达及功能鉴定[J].大连海洋大学学报,2023(2):275-283. |
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作者姓名: | 巫祎琴 陈福暖 张志强 江栢坚 简纪常 黄瑜 |
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作者单位: | 广东海洋大学水产学院广东省水产动物病害防控与健康养殖重点实验室 |
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基金项目: | 国家自然科学基金(32002426,32073006);;湛江市非资助科技攻关计划项目(2020B01169); |
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摘 要: | 为了解跨膜Bax抑制剂母体6(transmembrane Bax inhibitor motif containing 6, TMBIM 6)在尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)病原体感染中的作用,利用聚合酶链式反应(PCR)对Tmbim 6基因进行克隆与鉴定,并采用实时荧光定量PCR(qPCR)分析Tmbim 6在健康尼罗罗非鱼(体质量为80~100 g)的组织分布模式及无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)、Poly I:C模拟病毒刺激后的表达变化。结果表明:尼罗罗非鱼Tmbim 6开放阅读框为714 bp,可编码237个氨基酸,包含6个跨膜结构域和1个C-末端基序;亚细胞定位显示,尼罗罗非鱼TMBIM 6定位于细胞质,双荧光素酶报告基因系统检测发现,Tmbim 6在HEK-293T细胞中过表达后极显著抑制NF-κB通路(P<0.01);qPCR分析显示,Tmbim 6基因在所检测的组织中广泛分布,在肝脏和肌肉中的表达量最高;经无乳链球菌感染和Poly I:C刺激后,Tmbim 6在肝脏、脾脏、头肾、脑和肠道中的表达水平均显著上调...
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关 键 词: | 尼罗罗非鱼 Tmbim 6 亚细胞定位 NF-κB 基因表达 |
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