花生AFLP-银染体系的建立与优化 |
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引用本文: | 雷永,廖伯寿,王圣玉.花生AFLP-银染体系的建立与优化[J].花生学报,2003,32(Z1):301-305. |
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作者姓名: | 雷永 廖伯寿 王圣玉 |
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作者单位: | 中国农业科学院油料作物研究所,湖北,武汉,430062 |
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摘 要: | 通过对影响花生AFLP-银染技术体系的关键因素作对比研究,建立了一套优化的花生AFLP分子标记体系,该体系在应用于花生AFLP研究时,能够得到清晰的分子标记图谱,实验结果重复性好,稳定可靠.优化的关键因素为①采用细玻璃棒勾取DNA,而非离心的方法,可得到高纯度大分子量的DNA样品;②酶切DNA模板为300rng③酶切体系中,EcoRI和MseI分别加入4U,使用NEBbuffer 2;④连接最适温度为16℃过夜⑤预扩时PCR循环预变性时间为1min;⑥预扩产物最佳稀释倍数为75倍.
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关 键 词: | 花生 AFLP 体系优化 |
文章编号: | 1002-4093(2003)增刊-0301-05 |
修稿时间: | 2003年10月13 |
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