| 神经氨酸酶基因联合抗黏液病毒基因的抗病毒作用 |
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| 引用本文： | 傅德智,张亚妮,陈昊,李伟,郑蒙蒙,王丹,张振韬,施青青,李碧春. 神经氨酸酶基因联合抗黏液病毒基因的抗病毒作用[J]. 畜牧兽医学报, 2013, 0(1): 78-86 |
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| 作者姓名： | 傅德智 张亚妮 陈昊 李伟 郑蒙蒙 王丹 张振韬 施青青 李碧春 |
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| 作者单位： | 扬州大学动物科学与技术学院/江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室;苏州大学第一附属医院 |
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| 基金项目： | 江苏省高校自然科学重大基础研究项目资助(08KJA230001);高等学校博士学科点专项;“六大人才高峰”资助项目 |
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| 摘 要： | 拟构建神经氨酸酶(NA)基因和抗黏液病毒(Mx)基因双基因真核共表达载体,并检测基因表达以及转染鸡成纤维(CEF)细胞后的抗病毒效果。克隆了NA基因和突变型Mx基因的cDNA;分别定向插入真核细胞双顺反子载体pVITRO2中,酶切和测序鉴定双基因共表达载体pVITRO2-Mx-NA的正确性。用pVITRO2-Mx-NA转染NIH-3T3细胞,通过RT-PCR和间接免疫荧光(IFA)方法检测目的基因的表达。随后用pVITRO2-Mx-NA转染CEF细胞,利用RT-PCR及微量细胞病变抑制法测定重组蛋白抗新城疫病毒(NDV)的效果。结果:酶切和测序分析表明成功构建了双基因真核共表达载体pVITRO2-Mx-NA,在转染后的NIH-3T3和CEF细胞中同时检测到了NA和Mx基因的表达。联合基因表达的重组蛋白可保护CEF细胞在孵育的72h内免受NDV的感染,而转染了突变型Mx或者NA单基因真核表达载体的CEF细胞在孵育的48h内亦未受到NDV的侵染;与单基因转染组相比,联合基因转染组明显延迟NDV感染CEF细胞的时间,差异显著(P<0.05)。构建的双基因真核表达载体pVITRO2-Mx-NA转染CEF细胞后,其表达的重组蛋白Mx-NA在细胞水平上具有协同延缓NDV感染的能力,且优于单个基因。
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| 关 键 词： | NA Mx 双基因表达载体 抗病毒活性 抗NDV |
Antiviral Activities of Neuraminidase Gene Combining with Chicken Mx against Newcastle Disease Virus |
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| FU De-zhi,ZHANG Ya-ni,CHEN Hao,LI Wei,ZHENG Meng-meng,WANG Dan,ZHANG Zhen-tao,SHI Qing-qing,LI Bi-chun. Antiviral Activities of Neuraminidase Gene Combining with Chicken Mx against Newcastle Disease Virus[J]. Chinese Journal of Animal and Veterinary Sciences, 2013, 0(1): 78-86 |
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| Authors: | FU De-zhi ZHANG Ya-ni CHEN Hao LI Wei ZHENG Meng-meng WANG Dan ZHANG Zhen-tao SHI Qing-qing LI Bi-chun |
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| Affiliation: | 1(1.Institute of Animal Breeding and Genetics,Provincial Key Laboratory of Molecular Design,College of Animal Science and Technology,Yangzhou University,Yangzhou 225009, China;2.The First affiliated hospital of Soochow University,Suzhou 215006,China) |
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| Abstract: | |
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