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非洲猪瘟病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法的建立
引用本文:贾云飞,赵福杰,朱静静,王超群,吴亚楠,魏战勇.非洲猪瘟病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法的建立[J].河南农业大学学报,2020,54(1):69-73,80.
作者姓名:贾云飞  赵福杰  朱静静  王超群  吴亚楠  魏战勇
作者单位:河南农业大学经济与管理学院,河南 郑州450002,河南农业大学牧医工程学院,河南 郑州450002,河南农业大学牧医工程学院,河南 郑州450002,许昌海关,河南 许昌461000,河南农业大学牧医工程学院,河南 郑州450002,河南农业大学牧医工程学院,河南 郑州450002;河南省动物性食品安全重点实验室,河南 郑州450002
基金项目:前沿项目;中国工程院咨询研究重点项目
摘    要:为了建立非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)快速、敏感的检测方法,根据GenBank中登录的中国流行株ASFV-SY18的P72基因,建立了SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法,并对所建立方法的灵敏性、特异性与重复性进行了验证。结果显示,所建立的非洲猪瘟病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法能有效扩增1.0~1.0×10~9 copies·μL~(-1)的ASFV标准质粒,建立的标准曲线呈现良好的线性关系;检测灵敏度为1.0 copies·μL~(-1);对猪流行性腹泻病毒、猪δ冠状病毒、高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪伪狂犬病毒等病原不发生交叉反应,具有很好的特异性;重复性试验结果显示变异系数小于1%,重复性良好。

关 键 词:非洲猪瘟病毒  P72基因  实时荧光定量PCR  检测

Development of a SYBR Green Ⅰ based real-time quantitative PCR method for the detection of African swine fever virus
JIA Yunfei,ZHAO Fujie,ZHU Jingjing,WANG Chaoqun,WU Yanan,WEI Zhanyong.Development of a SYBR Green Ⅰ based real-time quantitative PCR method for the detection of African swine fever virus[J].Journal of Henan Agricultural University,2020,54(1):69-73,80.
Authors:JIA Yunfei  ZHAO Fujie  ZHU Jingjing  WANG Chaoqun  WU Yanan  WEI Zhanyong
Abstract:
Keywords:
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