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绵羊痘病毒甘肃流行株糖蛋白基因ORF117的克隆及其原核表达
引用本文:王晓霞,郑亚东,骆学农,陈轶霞,李辉,侯俊玲,于三科,才学鹏.绵羊痘病毒甘肃流行株糖蛋白基因ORF117的克隆及其原核表达[J].中国预防兽医学报,2009,31(5).
作者姓名:王晓霞  郑亚东  骆学农  陈轶霞  李辉  侯俊玲  于三科  才学鹏
作者单位:1. 中国农业科学院,兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室/甘肃省动物寄生虫病重点实验室;中国农业科学院,人兽共患病重点实验室,甘肃,兰州,730046;西北农林科技大学,动物医学院,陕西,杨陵,712100
2. 中国农业科学院,兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室/甘肃省动物寄生虫病重点实验室;中国农业科学院,人兽共患病重点实验室,甘肃,兰州,730046
3. 西北民族大学,生命科学与工程学院,甘肃,兰州,730046
4. 西北农林科技大学,动物医学院,陕西,杨陵,712100
基金项目:兰州市城关区农业科技攻关项目,中国农业科学院兰州兽医研究所所长基金 
摘    要:以甘肃景泰疑似羊痘(SP)患病绵羊的皮肤组织中提取的总DNA为模板,经PCR扩增获得SP病毒(SPV)ORF117基因.测序后分析表明,该基因由591个核苷酸组成,编码196个氨基酸;将该基因克隆于pET32 载体中,构建重组表达质粒pET-ORF117,用IPTG在不同条件下诱导表达,确定其最佳表达条件.SDS-PAGE电泳分析表明,表达的融合蛋白分子质量为42 ku,主要以包涵体的形式存在.在IPTG浓度为0.1 mM、温度为37℃、诱导6 h时表达量最大,约占菌体蛋白的30%.Western blot试验表明,融合蛋白可被羊痘阳性血清识别,这为研究其在新型疫苗和诊断的研究奠定了基础.

关 键 词:绵羊痘病毒  ORF117基因  克隆  原核表达

Cloning and prokaryotic expression of glycoprotein-encoding ORF117 from sheep pox virus Gansu strain
WANG Xiao-xia,ZHENG Ya-dong,LUO Xue-nong,CHEN Yi-xia,LI Hui,HOU Jun-ling,YU San-ke,CAI Xue-peng.Cloning and prokaryotic expression of glycoprotein-encoding ORF117 from sheep pox virus Gansu strain[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2009,31(5).
Authors:WANG Xiao-xia  ZHENG Ya-dong  LUO Xue-nong  CHEN Yi-xia  LI Hui  HOU Jun-ling  YU San-ke  CAI Xue-peng
Abstract:
Keywords:
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