犬瘟热病毒OP株囊膜糖蛋白F基因片段表达产物的免疫原性

根据已发表的犬瘟热病毒OP株核酸序列设计2对引物，以犬瘟热病毒OP株感染Vero细胞收获病毒提取的RNA为模板，应用RT—PCR扩增出F基因的769、832bp片段。将PCR产物按正确的阅读框架定向克隆进pGKX—6p—1载体中谷胱甘肽—S—转移酶(GST)基因的下游，再将重组质粒转化入宿主菌BL21中，在37℃ 1．0mmo1/L IPTG诱导下，F基因2个片段获得了良好的表达。表达产物经聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定，确定所表达的融合多肽大小分别为54000、56000。将表达产物回收后混合免疫小鼠，IFA显示，免疫小鼠血清能与病毒感染细胞呈现特异反应，并表现出1：16的中和抗体活性，表明体外表达的F多肽保留了天然蛋白的部分抗原性。