牛病毒性腹泻病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立 |
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引用本文: | 张光辉,刘占通,李祥瑞.牛病毒性腹泻病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立[J].中国兽医科技,2005,35(5):349-352. |
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作者姓名: | 张光辉 刘占通 李祥瑞 |
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作者单位: | [1]南京农业大学动物医学院,江苏南京210095 [2]河南农业大学牧医工程学院,河南郑州450002 [3]南京农业大学动物医学院,江苏南京210095//河南农业大学牧医工程学院,河南郑州450002 |
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摘 要: | 在MDBK细胞上增殖牛病毒性腹泻病毒(BVDV)HN-1株,用蔗糖密度梯度离心法纯化后免疫BALB/c小鼠,应用淋巴细胞杂交瘤技术,取脾细胞并与NS0骨髓瘤细胞融合,经间接ELISA筛选,3次有限稀释法克隆,得到4株能稳定分泌抗BVDV单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞株:3A8、3C7、3C11和3E9。经鉴定,3A8、3C7、3E9株为IgG1亚类,3C11株为IgG2a亚类;杂交瘤细胞的平均染色体数目为99条。3A8、3C7、3E9、3C11与BCV、BRV均无交叉反应,但3A8、3C7、3E9与HCV、BDV存在交叉反应,而3C11与HCV、BDV无交叉反应,3C11显示出较好的特异性;杂交瘤细胞培养上清液及小鼠腹水McAb的ELISA效价分别为1:1000和1:200000,该杂交瘤细胞连续培养20代后仍能稳定分泌抗体。这些McAb的获得为BVDV的研究及快速诊断方法的建立奠定了基础。
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关 键 词: | 牛 病毒性腹泻病毒 单克隆抗体 杂交瘤细胞株 快速诊断 |
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