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杜鹃花枯萎病菌TaqMan MGB探针实时荧光快速检测方法
作者姓名:段丽君  张慧丽  李雪莲  陈先锋  段维军
作者单位:1. 宁波检验检疫科学技术研究院;2. 宁波中盛产品检测有限公司;3. 宁波海关
基金项目:国家重点研发计划项目(2016YFF0203201);;国家留学基金资助项目;;宁波市科研项目(2015C110018,2019A610411);
摘    要:根据杜鹃花枯萎病菌(Ovulinia azaleae)及其近似种ITS基因序列差异,设计合成1对特异性引物和1条Taq Man-MGB探针,建立了杜鹃花枯萎病菌的实时荧光PCR检测方法。特异性试验结果表明,该检测方法能特异性检测杜鹃花枯萎病菌;灵敏度试验结果表明,最低检测限量为10μL反应体系中总DNA含量0.25 pg;实际样品检测结果表明,该方法可用于疑似携带杜鹃花枯萎病菌样品的检测与初筛。此方法快速、灵敏,整个反应过程约1 h,检测过程完全闭管,无需PCR后处理,为杜鹃花枯萎病菌早期诊断检测提供了重要参考。

关 键 词:杜鹃花  枯萎病菌  实时荧光PCR  TaqMan-MGB探针  检测
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