非洲猪瘟病毒实时荧光LAMP检测方法的建立与应用 |
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引用本文: | 王林,高晓龙,吴迪,张玮,张启龙,栗云鹏,程汝佳,杜鹃,李蕊,王培,冯小宇,韦海涛,周德刚,刘晓冬,宋彦军.非洲猪瘟病毒实时荧光LAMP检测方法的建立与应用[J].中国兽药杂志,2020,54(8):1-8. |
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作者姓名: | 王林 高晓龙 吴迪 张玮 张启龙 栗云鹏 程汝佳 杜鹃 李蕊 王培 冯小宇 韦海涛 周德刚 刘晓冬 宋彦军 |
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作者单位: | 北京市动物疫病预防控制中心,,,,,,,,,,,,,,北京市动物疫病预防控制中心 |
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基金项目: | 北京市科技计划课题(Z191100004019008) |
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摘 要: | 为建立一种快速简便、灵敏度高、准确性好的非洲猪瘟病毒恒温快速检测方法,根据ASFV P72基因保守区域设计特异性引物,优化引物浓度、反应温度、反应时间,建立了一种基于SYTO9荧光染料的非洲猪瘟病毒实时荧光LAMP快速检测方法。结果表明,该方法在63℃条件下扩增40 min,该方法灵敏度高,最低可检测限为10 copies/μL;特异性良好,与猪伪狂犬病毒、猪瘟病毒、美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒、欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪流行性腹泻病毒无交叉反应;重复性好,变异系数低于5%。对70份临床样本检测,4份血液样品和9份脾脏样品检测阳性,与荧光定量PCR检测结果符合率为100%。该方法灵敏度高、特异性强、重复性好、符合率高,适用于非洲猪瘟现场快速诊断。
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关 键 词: | 非洲猪瘟病毒 实时 荧光环介导等温扩增 |
收稿时间: | 2020/4/1 0:00:00 |
修稿时间: | 2020/7/24 0:00:00 |
Establishment and Application of Real-time Fluorescent LAMP for Detection of African Swine Fever Virus |
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Institution: | Beijing Animal Disease Prevention and Control Center,Beijing,102629;China,,,,,,,,,,,,,, |
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Abstract: | |
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Keywords: | African Swine Fever Virus Real-time Fluorescent LAMP |
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