PKC、PKA和TPK在血小板激活中的作用

目的：研究蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ），蛋白激酶Ａ（ＰＫＡ），酪氨酸蛋白激酶（ＴＰＫ）在血小板聚集激活中的作用。方法：本实验是在阿斯匹林阻断花生四烯酸代谢，Ａｐｙｒａｓｅ去除ＡＤＰ情况下，利用３２Ｐ－ＮａＨ２ＰＯ４标记猪血小板，然后以ＰＭＡ、凝血酶、ＰＧＦ１、腺苷等处理。以血小板聚集仪测定血小板聚集；ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分离血小板蛋白；并进行放射自显影；碱处理电泳凝胶检测酪氨酸蛋白激酶（ＴＰＫ）底物；ＴＬＣ进行磷酸氨基酸分离。结果：（１）随着ＰＭＡ激活ＰＫＣ，血小板发生聚集；（２）３５μｍｏｌ／ＬＰＧＦ１或１ｍｍｏｌ／Ｌｄｂ－ｃＡＭＰ不能抑制５０ｎｍｏｌ／ＬＰＭＡ诱导的血小板聚集，腺苷却能抑制ＰＭＡ诱导的血小板聚集（ＥＣ５０＝０．１ｍｍｏｌ／Ｌ）．（３）ｄｂ－ｃＡＭＰ、腺苷都不能抑制１００ｎｍｏｌ／ＬＰＭＡ诱导的４０ｋＤ蛋白磷酸化，ＰＫＡ激活不能抑制ＰＭＡ激活的ＰＫＣ。（４）在ＰＭＡ、凝血酶激活的血小板中，ＰＫＣ、ＴＰＫ都发生激活，４０ｋＤ底物既是ＰＫＣ的底物又是ＴＰＫ的底物。结论：ＰＫＣ和ＴＰＫ在血小板聚集中起着重要的调节作用。