体外建立dsRNA结合甲基化转移酶抑制剂转染猪肾细胞的模型

猪病毒性疾病对现代养猪业造成了巨大的经济损失。猪RNA病毒基因组在复制过程中形成双链RNA(ds RNA)的复制型中间体,并诱导I型干扰素的产生,从而对病毒的增殖起抑制作用,这是宿主抗RNA病毒感染的重要天然防线。猪许多病毒的ds RNA对上皮细胞有明显的趋化作用,而DNA甲基化转移酶抑制剂Aza-Cd R可诱导感染细胞凋亡并发挥抗病毒作用。本实验结合荧光定量PCR,计算干扰素相关基因(TLR3、IRF、IFNA)的相对表达量。同时,通过设计剂量和时间依赖实验,利用CCK8实验方法,计算细胞生存比率,最终确定ds RNA模拟物Poly I:C体外转染PK15细胞后,Aza-Cd R处理的理想细胞转染模型。此模型能有效地在体外模拟活病毒感染细胞的效果,更便于在常规实验室使用,是研究猪宿主与病毒感染关系的理想细胞模型。