猪圆环病毒复合PCR检测方法的建立 |
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引用本文: | 朱军莉,余旭平,时晗,吴海波,金俊杰,何世成.猪圆环病毒复合PCR检测方法的建立[J].中国兽医科技,2004,34(2):38-42. |
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作者姓名: | 朱军莉 余旭平 时晗 吴海波 金俊杰 何世成 |
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作者单位: | [1]浙江大学动物科学学院,浙江杭州310029 [2]东北农业大学生命科学学院,黑龙江哈尔滨150030 |
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摘 要: | 根据已发表的PCV—1和PCV-2全基因组序列,设计了3条引物,组成PCV-2的特有引物对和PCV-1、PCV-2的共有引物对,分别扩增长度为472bp和339bp的片段。为验证PCR扩增的特异性,将472bp的扩增产物纯化后,克隆到pMD18-T载体,转化大肠埃希氏菌TG1,对阳性克隆进行酶切及PCR鉴定,并测序。将该序列递交NCB1进行BL-AST同源序列比较,发现它与美国、加拿大及我国台湾的PCV-2毒株核苷酸序列的同源性均在99%以上,与PCV—1毒株的同源性为86%。结果显示,该方法最少可用于3μg病料组织和0.75pg DNA的PCV-2检出.具有很高的灵敏性。应用该PCR方法检测了浙江省和上海市47份“猪高热综合征”病料,PCV-2感染阳性率为36.17%,PCV—1单独感染阳性率为34.04%。
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关 键 词: | 猪圆环病毒 复合PCR检测方法 多系统衰竭综合征 同源序列 |
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