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禽流感、新城疫可目视化诊断蛋白芯片的制备及初步应用
引用本文:石霖,王秀荣,杨忠苹,陶启蒙,王煜,武嘉男,蔡冬冬,包红梅,陈化兰. 禽流感、新城疫可目视化诊断蛋白芯片的制备及初步应用[J]. 中国预防兽医学报, 2009, 31(1)
作者姓名:石霖  王秀荣  杨忠苹  陶启蒙  王煜  武嘉男  蔡冬冬  包红梅  陈化兰
作者单位:1. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江,哈尔滨,150001
2. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江,哈尔滨,150001;东北农业大学,动物医学学院,黑龙江,哈尔滨,150030
3. 重庆出入境检验检疫局,重庆,400020
基金项目:中俄、国际合作项目,国家科技攻关项目 
摘    要:本研究制备了可以同时鉴别诊断禽流感(AI)、新城疫(ND)2种禽病血清抗体的可视化蛋白芯片.以超速离心法和蔗糖密度梯度法分别纯化了2种病毒蛋白抗原,用点样缓冲液稀释后点于醛基修饰的片基上,制备蛋白芯片;将芯片与待检血清杂交后,再与胶体金标记的二抗杂交,银染显色后根据灰度值判定结果,从而建立了2种禽病的可视化蛋白芯片鉴别诊断方法.采用该方法对18份现地血清样品进行初步检测,结果显示该芯片可特异性的与相应的抗体杂交,无交叉反应,而且呈现较强的杂交信号,其信号灰度值在阳性血清浓度为50μg/mL~300μg/mL范围内成线性关系(Y=0.426X+4.225).用该芯片方法和琼扩(AGP)抗体检测方法对18份现地样品进行符合率检测,结果表明该可视化蛋白芯片具有很好的特异性,并且检测灵敏度为是AGP方法的400倍以上.研究表明该方法可用于同步鉴别2种禽病,是一种有效的抗体检测新方法.

关 键 词:禽流感  新城疫  可视化  诊断  蛋白芯片

Preparation and preliminary application of a visual diagnostic protein chip for avian influenza and Newcastle disease
SHI Lin,WANG Xiu-rong,YANG Zhong-ping,TAO Qi-meng,WANG Yu,WU Jia-nan,CAI Dong-dong,BAO Hong-mei,CHEN Hua-lan. Preparation and preliminary application of a visual diagnostic protein chip for avian influenza and Newcastle disease[J]. Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine, 2009, 31(1)
Authors:SHI Lin  WANG Xiu-rong  YANG Zhong-ping  TAO Qi-meng  WANG Yu  WU Jia-nan  CAI Dong-dong  BAO Hong-mei  CHEN Hua-lan
Abstract:
Keywords:
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