茶花品种ISSR指纹图谱反应体系建立与优化 |
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引用本文: | 胡兴华,李景剑,王燕,黄仕训.茶花品种ISSR指纹图谱反应体系建立与优化[J].北方园艺,2014(22). |
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作者姓名: | 胡兴华 李景剑 王燕 黄仕训 |
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作者单位: | 广西壮族自治区中国科学院广西植物研究所,广西桂林,541006;广西壮族自治区中国科学院广西植物研究所,广西桂林,541006;广西壮族自治区中国科学院广西植物研究所,广西桂林,541006;广西壮族自治区中国科学院广西植物研究所,广西桂林,541006 |
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基金项目: | 广西科技攻关资助项目(桂科攻10100012-4) |
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摘 要: | 以30个茶花品种为试材,采用5因素4水平正交实验以及单因素优化试验方法,研究Mg2+浓度、dNTP浓度、引物浓度、Taq DNA聚合酶浓度和模板DNA浓度对ISSR-PCR指纹图谱条带清晰度的影响,以进行茶花品种ISSR-PCR反应体系优化及引物筛选。结果表明:茶花品种ISSR-PCR最适扩增条件为25μL反应体系中,Mg2+3.0mmol/L、dNTPs 0.2mmol/L、引物0.3mmol/L、Taq DNA聚合酶0.5U、模板DNA 80ng以及52.1℃退火温度;试验从100个ISSR引物中筛选出12个适用引物;并对12个ISSR引物的多态性和稳定性进行了检验。
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关 键 词: | 茶花品种 分子指纹图谱 ISSR体系优化 引物筛选 |
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