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猪瘟病毒RT-nested PCR检测方法的优化和应用
引用本文:朱小甫,张 志,李晓成. 猪瘟病毒RT-nested PCR检测方法的优化和应用[J]. 西北农林科技大学学报(自然科学版), 2007, 35(6): 11-14
作者姓名:朱小甫  张 志  李晓成
作者单位:1. 西北农林科技大学,动物科技学院,陕西,杨凌,712100;中国动物卫生与流行病学中心,山东,青岛,266032
2. 中国动物卫生与流行病学中心,山东,青岛,266032
3. 西北农林科技大学,动物科技学院,陕西,杨凌,712100
摘    要:为了优化猪瘟病毒的RT-nested PCR检测方法,对福建省猪瘟流行情况进行了调查。根据GenBank上发表的猪瘟病毒Shimen株基因序列设计并合成了2对引物,优化了猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)的RT-nested PCR检测方法,并对所优化的RT-nested PCR特异性进行了检验。结果表明,该方法检测CSFV cDNA含量的最低极限为1×10-7ng/mL,只有CSFV扩增出了272 bp的目的条带,从猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪流感病毒(SIV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪伪狂犬病病毒(PRV)和猪细小病毒(PPV)阳性毒和健康猪脾、肝组织及阴性PK-15细胞均未扩增出特异性条带,说明该方法特异性强。应用此方法对福建省133份病料进行检测,结果有60份病料为阳性,阳性率为45.1%。结果提示优化的检测方法灵敏度高,特异性强;福建省猪群CSFV感染率高,需要加强CSF预防控制工作。

关 键 词:猪瘟病毒  RT-nestedPCR  检测方法
文章编号:1671-9387(2007)06-0011-04
收稿时间:2006-05-11
修稿时间:2006-05-11

Optimization and application of RT-nested PCR detection for classical swine fever virus
ZHU Xiao-fu,ZHANG Zhi,LI Xiao-cheng,CHEN De-kun,WU Xu-jin. Optimization and application of RT-nested PCR detection for classical swine fever virus[J]. Journal of Northwest A&F University(Natural Science Edition), 2007, 35(6): 11-14
Authors:ZHU Xiao-fu  ZHANG Zhi  LI Xiao-cheng  CHEN De-kun  WU Xu-jin
Affiliation:1 (1 College of Animal Science and Technology,Northwest A & F University,Yangling,Shaanxi 712100,China;2 China Animal Health and Epidemiology Center,Qingdao,Shandong 266032,China)
Abstract:
Keywords:RT-nested PCR
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