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| 鸡CDC25B-mRNA探针制备及其在鸡十二指肠黏膜的原位杂交反应 | |
| 引用本文： | 覃君慧,侯放亮,张晖,包慧君,周强,李梅英,初晓红,陈秋生.鸡CDC25B-mRNA探针制备及其在鸡十二指肠黏膜的原位杂交反应[J].畜牧兽医学报,2009,40(5). |
| 作者姓名： | 覃君慧 侯放亮 张晖 包慧君 周强 李梅英 初晓红 陈秋生 |
| 作者单位： | 1. 南京农业大学动物医学院,南京,210095 2. 陕西省家畜改良站,泾阳,713702 3. 西北农林科技大学动物医学院,杨凌,712100 |
| 摘 要： | 应用RT-PCR方法从鸡胚中扩增CDC25B基因片段，将其连接于pGM-Teasy。分别利用pGM-Teasy中T7和SP6启动子及其RNA聚合酶，以线性化的CDC25B/pGM-Teasy为模板转录合成正、反义DIG标记RNA探针。以合成的地高辛（DIG）标记的CDC25B-mRNA为探针，进一步应用原位杂交组织化学方法（in situhybridiza-tion histochemistry，ISHH）探查CDC25B-mRNA在鸡十二指肠黏膜的分布。结果表明，成年鸡十二指肠肠腺上皮细胞中有丰富的CDC25B-mRNA的转录，其中CDC25B-mRNA探针杂交阳性细胞在肠腺基底部和小肠绒毛中部分别占上皮细胞总数的81.60%±9.63%和36.21%±8.81%。原位杂交阳性产物大部分分布于十二指肠肠腺上皮“干细胞部”和“增生部”细胞的胞质和胞核，肠腺基底部杂交信号由下至上逐渐减弱，至小肠绒毛下部消失，转为阴性。在黏膜肌层以及肌肉层杂交反应呈阴性。本研究从基因水平证明了鸡十二指肠黏膜肠腺上皮“干细胞部”和“增生部”细胞中有CDC25B-mRNA的存在，表明该区域有活跃的增殖过程，以补充绒毛上端死亡脱落的细胞。 |
| 关 键 词： | 鸡十二指肠黏膜 CDC25B-mRNA 探针合成 原位杂交 |
Preparation of Chicken CDC25B-mRNA Probe and Its Detection in Duodenal Mucosa by in situ Hybridization |
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| QIN Jun-hui,HOU Fang-liang,ZHANG Hui,BAO Hui-jun,ZHOU Qiang,LI Mei-ying,CHU Xiao-hong,CHEN Qiu-sheng.Preparation of Chicken CDC25B-mRNA Probe and Its Detection in Duodenal Mucosa by in situ Hybridization[J].Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica,2009,40(5). | |
| Authors: | QIN Jun-hui HOU Fang-liang ZHANG Hui BAO Hui-jun ZHOU Qiang LI Mei-ying CHU Xiao-hong CHEN Qiu-sheng |
| Abstract: | |
| Keywords: | CDC25B-mRNA |
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