| piggyBac转座子介导的家蚕细胞转基因研究初探 |
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| 引用本文： | 周文林,王崇龙,刘波,曹广力,薛仁宇,沈卫德,贡成良. piggyBac转座子介导的家蚕细胞转基因研究初探[J]. 蚕业科学, 2007, 33(1): 30-35 |
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| 作者姓名： | 周文林 王崇龙 刘波 曹广力 薛仁宇 沈卫德 贡成良 |
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| 作者单位： | 苏州大学生命科学学院,苏州,215123;苏州大学生命科学学院,苏州,215123;苏州大学生命科学学院,苏州,215123;苏州大学生命科学学院,苏州,215123;苏州大学生命科学学院,苏州,215123;苏州大学生命科学学院,苏州,215123;苏州大学生命科学学院,苏州,215123 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展计划(973计划) , 国家自然科学基金 , 江苏省研究生培养创新工程项目 |
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| 摘 要： | 为探讨稳定转化家蚕细胞表达外源基因的新方法,以家蚕核型多角体病毒(BmNPV)极早期蛋白基因(ie-1)启动子元件驱动新霉素抗性基因(neor),并克隆至具有绿色荧光蛋白基因(gfp)标记的昆虫转座子载体piggyBac中,构建转基因载体pigA3-IE-Neo。以该载体转染家蚕BmN细胞,用终浓度800μg/mL的遗传霉素(geneticin,G418)筛选3个月,获得了稳定转化的细胞,呈现绿色荧光的细胞数达80%以上。通过PCR鉴定证实了细胞基因组DNA中neor基因和gfp基因的存在。
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| 关 键 词： | 转基因 家蚕 piggyBac转座子 家蚕细胞 |
| 文章编号： | 0257-4799(2007)01-0030-06 |
| 修稿时间： | 2006-07-29 |
The Elementary Transgene Research of Silkworm Cells Mediated by Transposon piggyBac |
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| ZHOU Wen-Lin,WANG Chong-Long,LIU Bo,CAO Guang-Li,XUE Ren-Yu,SHEN Wei-De,GONG Cheng-Liang. The Elementary Transgene Research of Silkworm Cells Mediated by Transposon piggyBac[J]. Acta Sericologica Sinica, 2007, 33(1): 30-35 |
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| Authors: | ZHOU Wen-Lin WANG Chong-Long LIU Bo CAO Guang-Li XUE Ren-Yu SHEN Wei-De GONG Cheng-Liang |
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| Affiliation: | College of Life Science, Soochow University, Suzhou Jiangsu 215123, China |
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| Abstract: | Neomycin resistance gene driven by ie-1 promoter element of Bombyx mori nucleopolyhedrorvirus was cloned into insect transposon vector piggyBac,which contains gfp report gene,to form transgenic vector pigA3-IE-Neo.Then it was used to transfect BmN cell.Screening under G418 at 800 μg/mL final concentration for three months a stable transformation cell strain with over 80% fluorescent cells was obtained.Identification of PCR indicated that neor and gfp genes existed in the genomic DNA of the transgenic cell strain.This study brought forward a new way to express interesting gene by using stable transformation cell. |
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| Keywords: | Transgene Bombyx mori Transposon piggyBac Silkworm cells |
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