| 牛骨骼肌卫星细胞的分离鉴定和诱导分化 |
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| 引用本文： | 赵新艳,郭妍婷,陈俊贞,李泽宇,史慧君,付强. 牛骨骼肌卫星细胞的分离鉴定和诱导分化[J]. 中国畜牧兽医, 2020, 47(10): 3249-3258. DOI: 10.16431/j.cnki.1671-7236.2020.10.024 |
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| 作者姓名： | 赵新艳 郭妍婷 陈俊贞 李泽宇 史慧君 付强 |
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| 作者单位： | 新疆农业大学动物医学学院, 乌鲁木齐 830052 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目（31560328、31760742）；新疆农业大学畜牧学博士后流动站工作（博士后编号168138） |
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| 摘 要： | 为了在体外研究西门塔尔牛的肌肉生长发育过程并建立牛骨骼肌卫星细胞的原代细胞模型。本研究采用0.2%的Ⅱ型胶原酶消化后再使用0.25%胰酶消化获得牛骨骼肌卫星细胞（bovine skeletal satellite cell，BSSC），并利用差速贴壁法分离获得纯化后的BSSC，使用RT-PCR、免疫荧光染色和Western blotting等方法鉴定BSSC，使用成脂诱导剂诱导其分化为脂肪细胞，油红O染色鉴定分化后细胞的成脂能力，使用2%马血清诱导其分化为肌细胞，RT-PCR鉴定静止期PAX7基因和肌细胞的标记基因MyoG在诱导前后表达量的变化。结果发现，分离纯化得到的BSSC呈梭形或纺锤形，细胞形态饱满，折光性强，随着培养时间的延长，细胞由原来的无序生长变为有序生长；RT-PCR检测发现，BSSC表面标志基因Desmin、c-Met、Myf5和特异性标志基因PAX7均呈阳性表达；免疫荧光染色及Western blotting结果显示，PAX7和MyoD基因均呈阳性表达；成脂细胞诱导分化后被油红O大量染色并观察到大量脂滴出现；成肌细胞诱导分化后静止时期PAX7基因表达量诱导前高于诱导分化后，而成肌标记基因MyoG表达量诱导前低于诱导分化后。综上，本研究成功分离获得BSSC，并证明BSSC具有分化成脂肪细胞和肌细胞的能力，为体外研究西门塔尔牛肉制品调控机制提供原代细胞模型。
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| 关 键 词： | 牛骨骼肌卫星细胞 PAX7 诱导分化 成肌细胞 成脂细胞 |
| 收稿时间： | 2020-04-01 |
Isolation,Identification and Differentiation of Bovine Skeletal Muscle Satellite Cells |
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| ZHAO Xinyan,GUO Yanting,CHEN Junzhen,LI Zeyu,SHI Huijun,FU Qiang. Isolation,Identification and Differentiation of Bovine Skeletal Muscle Satellite Cells[J]. China Animal Husbandry & Veterinary Medicine, 2020, 47(10): 3249-3258. DOI: 10.16431/j.cnki.1671-7236.2020.10.024 |
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| Authors: | ZHAO Xinyan GUO Yanting CHEN Junzhen LI Zeyu SHI Huijun FU Qiang |
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| Affiliation: | College of Animal Medicine, Xinjiang Agricultural University, Urumqi 830052, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | bovine skeletal muscle satellite cells PAX7 induced differentiation myoblasts adipocytes |
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