奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌gyrA、gyrB、grlA、grlB和norA基因突变与环丙沙星耐药性关系

采用药敏纸片法测定了临床分离160株奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌对14种抗菌药物的耐药性,同时进行了MRSA的检测,并采用琼脂稀释法测定纸片法筛选出的45株金黄色葡萄球菌对环丙沙星的MIC.对金黄色葡萄球菌gyrA、gyrB、grlA、grlB和norA基因设计引物,以选出的45株金黄色葡萄球菌染色体DNA为模板,对金黄色葡萄球菌gyrA、gyrB、grlA、grlB和norA基因片段进行PCR扩增,对PCR产物进行纯化,并与pMD18-T载体连接,连接产物转化DH5α感受态大肠杆菌,提取质粒并测序.进一步分析考查金黄色葡萄球菌gyrA、gyrB、grlA、grlB和norA基因及其启动子区突变与环丙沙星敏感性的关系.结果表明,grlA中的两个突变(位于80和84密码子)及gyrA中的两个突变(位于84和88密码子)与环丙沙星耐药性明显相关.