磺胺甲嗯唑单克隆抗体的研制及免疫金标试纸检测方法的建立 |
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作者姓名: | 刘宣兵 张改平 刘庆堂 彩鸿翔 杨继飞 滕蔓 邓瑞广 侯玉泽 王自良 |
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作者单位: | [1]河南省农业科学院动物免疫学重点实验室,河南郑州450002 [2]河南科技大学食品与生物工程学院,河南洛阳471003 [3]河南科技学院动物科学学院,河南新乡453003 |
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摘 要: | 用磺胺甲嗯唑人工免疫原(BSA-SMZ)免疫BALB/C小鼠(Mus muscalus),细胞融合技术筛选抗磺胺甲嗯唑单克隆抗体(SMZ mAb)杂交瘤细胞,体内诱生腹水法制备SMZ mAb,并鉴定其免疫学特性;应用SMZ mAb研制SMZ残留快速检测金标试纸(SMZ-strip),并测定其性能。结果表明,筛选出3株杂交瘤细胞,其中最好的3G6株间接ELISA效价细胞培养上清为1:8.1×10^2,腹水为1:6.4×10^5,亲和常数(K=a)为3.07×10^9L/mol,对SMZ的半数抑制浓度(IC50)为12.4μg/L,与磺胺嘧啶的交叉反应率(CR%)为2.84%,与其它磺胺类药物无交叉反应;SMZ-strip目测检测限为6μg/L;其敏感性与竞争ELISA试剂盒相当,符合率为100%;SMZ-strip具有快速、敏感、特异、简便等特点,适合于SMZ残留快速检测的推广应用。
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关 键 词: | 磺胺甲嗯唑 细胞融合 单克隆抗体 胶体金免疫层析试验 快速检测试纸 |
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