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猪肥胖基因片断的克隆及不同日龄猪肥胖基因表达的差异
引用本文:汪以真,初晓娜,黄海青,韩菲菲. 猪肥胖基因片断的克隆及不同日龄猪肥胖基因表达的差异[J]. 农业生物技术学报, 2005, 13(2): 186-190
作者姓名:汪以真  初晓娜  黄海青  韩菲菲
作者单位:浙江大学饲料科学研究所,杭州,310029
基金项目:国家重点基础研究发展计划项目(973)(No.2004CB117500)资助.
摘    要:从杜长嘉(Duroex Landracex Taihu)猪的皮下脂肪中提取基因组RNA,用RT-PCR扩增肥胖基因(obesegene;ob),获得1条504bp的片断,以pGEM-T Easy Vector为载体,将该基因片断克隆到大肠杆菌(Eschenchia coli)中。从筛选到的阳性克隆中分离出肥胖基因,测定其序列,分析表明该片段为肥胖基因cDNA的部分序列,编码167个氨基酸组成的多肽,是成熟肽的主体部分。研究得到的基因片段与报道的猪脂肪组织中ob cDNA部分序列同源性达到99.41%。氨基酸序列同源性达到98.94%。以ob基因片段的克隆为基础,构建了优化的半定量RT-PCR法,以β-actin为内标,研究不同日龄的猪脂肪组织ob基因表达的差异,1-28日龄ob基因表达呈上升趋势,28日龄达到最高,随后,到56日龄ob基因表达又呈下降趋势。

关 键 词:基因表达 不同日龄 基因片断 RT-PCR法 猪 序列同源性 Vector 基因cDNA 肥胖基因 脂肪组织 基因片段 PCR扩增 氨基酸组成 皮下脂肪 Easy 大肠杆菌 阳性克隆 主体部分 上升趋势 RNA 基因组 分析表 成熟肽 半定量 载体 多肽
修稿时间:2004-04-18

Cloning of Obese (ob) Gene of Swine and the Difference of ob Gene Expression at Different Ages
WANG Yi-zhen,CHU Xiao-Na,HUANG Hai-qing,HAN Fei-Fei. Cloning of Obese (ob) Gene of Swine and the Difference of ob Gene Expression at Different Ages[J]. Journal of Agricultural Biotechnology, 2005, 13(2): 186-190
Authors:WANG Yi-zhen  CHU Xiao-Na  HUANG Hai-qing  HAN Fei-Fei
Abstract:
Keywords:
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