| 正交设计优化大旗瓣凤仙ISSR-PCR反应体系 |
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| 引用本文： | 赵博,李景剑,符支宏,钟树华. 正交设计优化大旗瓣凤仙ISSR-PCR反应体系[J]. 南方农业学报, 2014, 45(2): 184-188. DOI: 10.3969/j:issn.2095-1191.2014.2.184 |
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| 作者姓名： | 赵博 李景剑 符支宏 钟树华 |
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| 作者单位： | 中国科学院广西植物研究所,广西桂林,541006中国科学院广西植物研究所,广西桂林541006广西师范大学生命科学学院,广西桂林541004 |
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| 基金项目： | 财政部战略生物资源科技支撑运转专项项目 |
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| 摘 要： | [目的]优化大旗瓣凤仙ISSR-PCR反应体系,为大旗瓣凤仙遗传多样性分析提供技术参考.[方法]利用正交试验设计对大旗瓣凤仙ISSR-PCR反应体系的5个因素(Mg2+、dNTP、引物、TaqDNA聚合酶、模板DNA)4水平进行优化分析,并在此基础上对PCR反应过程中的退火温度进行筛选.[结果]建立了大旗瓣凤仙ISSR-PCR的优化反应体系,即在25.0 μL反应体系中含1×PCR Buffer、Mg+ 1.5 mmol/L、dNTP 0.25 mmol/L、引物0.8 μmol/L、TaqDNA聚合酶0.75~1.00 U、模板DNA 100 ng.通过该体系可以筛选出6条对大旗瓣凤仙种群扩增效果较好的引物.[结论]优化的ISSR-PCR反应体系具有较高的稳定性,可用于大旗瓣凤仙及凤仙属植物种群的ISSR遗传多样性分析.
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| 关 键 词： | 大旗瓣凤仙 ISSR-PCR 反应体系 优化 正交设计 |
Optimization for ISSR-PCR reaction system in Impatiens macrovexilla Y.L.Chen using orthogonal design |
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| ZHAO Bo,LI Jing-jian,FU Zhi-hong,ZHONG Shu-hua. Optimization for ISSR-PCR reaction system in Impatiens macrovexilla Y.L.Chen using orthogonal design[J]. Journal of Southern Agriculture, 2014, 45(2): 184-188. DOI: 10.3969/j:issn.2095-1191.2014.2.184 |
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| Authors: | ZHAO Bo LI Jing-jian FU Zhi-hong ZHONG Shu-hua |
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