摘 要: | 将口蹄疫病毒VP1基因克隆至原核表达载体pBAD/TOPO中,经鉴定后得到了重组质粒pBAD-VP1。将此重组质粒转化到受体茵TOP10中,分别以不同浓度的诱导剂L-阿拉伯醛糖进行诱导,并在不同诱导时间进行采样,经处理后做SDS-PAGE和蛋白质印迹分析。结果,以终浓度为0.02g/L的L-阿拉伯醛糖进行诱导,4h后表达可达到高峰,表达产物大小约为40ku。软件扫描结果显示,VP1融合蛋白的表达量占细菌总蛋白的26.3%,能与抗FMDV抗体发生特异性反应,融合蛋白以包涵体和可溶形式存在。抽提融合蛋白的包涵体,经过洗涤后制成油乳荆疫苗,经皮下注射免疫豚鼠,用乳鼠中和试验测定豚鼠血清中和指数,并用口蹄疫病毒对豚鼠进行攻毒。结果表明,用此融合蛋白的包涵体免疫豚鼠能诱导产生中和抗体,并对病毒的攻击提供免疫保护。
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